样本多，制备单细胞质量下降，导致染色效果差

shupian

同时处理的样本太多，导致制备的单细胞质量下降，染色一塌糊涂，有什么好办法解决吗？

每次30只老鼠，一只老鼠要取4个样本，2个淋巴结、脾脏、肿瘤，总共120个样本做单细胞

现在临近毕业，组里没人，最近做的2批数据都没法看，连CD45都染不出来。

我自己单独取几只老鼠做单细胞，染色效果都很好。

面对大量样本的时候有什么好方法可以处理吗？

niwanmao

可以考虑：
取完一只，解离单细胞，加入冻存液（DMSO和FBS），冻到-80℃。
接着再处理下一只，重复上一步。
全部取完后，找一天空的时间，全部37℃水浴复苏，洗涤去掉冻存液，开始常规染色操作。

供参考。

wxd

如果实验对处死时间要求很严格，必须同时处死的话，买点吃的，或者干脆出点钱，拉一批其他实验室有动物实验经验的同学帮忙；找附近的生物外包公司的话，会贵很多。
如果对处死时间要求不是很严格的话，根据分组情况，每天从这几组老鼠中选一只进行处理，这样每天的工作量就只有几只老鼠，楼主可以自己完成；30只老鼠，顺利的话，5天可以杀完。

苏沁沁

niwanmao 发表于 2024-5-18 20:46
可以考虑：
取完一只，解离单细胞，加入冻存液（DMSO和FBS），冻到-80℃。
接着再处理下一只，重复上一步。 ...

冻存液有要求吗？感觉自己配的冻存液里有DMSO对原代组织影响还是有的

niwanmao

苏沁沁 发表于 2024-5-24 15:39
冻存液有要求吗？感觉自己配的冻存液里有DMSO对原代组织影响还是有的

DMSO肯定会有影响的，只是为了长时间保存，其得益还是胜过损失吧