PD-1的淋巴细胞群

王美丽

想请问一下大家有没有作过PD-1的检测的，我用的是5色PD-1,FMO管分别用CD45/SSC和FSC/SSC两张图圈出了淋巴细胞

但是后续跑阴性管单染管的时候FSC/SSC的淋巴细胞群的位置就有偏移，和原来门的位置不一样（我的所有单染管，FMO，阴性管都是同步做的，并且加的血也是同一个人的血）不知道问题是出在了哪里

niwanmao

同样处理、同一条件、同一时间跑出这样偏移的话，首先需考虑仪器液路稳定性了

PD-1的分群有时候欠佳，需注意参考Naive CD4+T作为设门参照。

王美丽

老师，如果不光是我自己操作会遇到这种问题，身边人用不同机型同样操作也会经常遇到这种问题可能会是什么原因呀

niwanmao

王美丽 发表于 2024-6-23 20:13
老师，如果不光是我自己操作会遇到这种问题，身边人用不同机型同样操作也会经常遇到这种问题可能会是什么原 ...

仪器日常做好性能监测，否则不好找原因

王美丽

好的谢谢老师

yuksing

niwanmao 发表于 2024-6-22 11:19
同样处理、同一条件、同一时间跑出这样偏移的话，首先需考虑仪器液路稳定性了

PD-1的分群有时候欠佳，需注 ...

老师，请教一下，我们现在检测细胞分化与衰竭，也遇到PD-1分群的问题。我们是用只染色了CD3,4,8的管阴性设门，看PD-1在CD3+中的比例。同时染了CD45RA/CCR7等，老师这里的参考Naive CD4+T设门，适用于我们这种情况吗？是用PD-1在CD4+CD45RA+中作用阴性对照吗？

niwanmao

yuksing 发表于 2024-11-20 17:23
老师，请教一下，我们现在检测细胞分化与衰竭，也遇到PD-1分群的问题。我们是用只染色了CD3,4,8的管阴性 ...

适合的

yuksing

niwanmao 发表于 2024-11-21 08:13
适合的

谢谢老师，用只染色了CD3,4,8的管阴性设门，我试了用Naive CD4+T设门，与用CD3设门好像区别不大。

niwanmao

yuksing 发表于 2024-11-21 17:13
谢谢老师，用只染色了CD3,4,8的管阴性设门，我试了用Naive CD4+T设门，与用CD3设门好像区别不大。 ...

可把图发上来看看吗，如果无差别，有可能是表达量低，也可能是没染好或抗体克隆性能不佳

yuksing

niwanmao 发表于 2024-11-22 08:27
可把图发上来看看吗，如果无差别，有可能是表达量低，也可能是没染好或抗体克隆性能不佳 ...

麻烦老师帮忙看看有没问题，PD-1抗体是BD 563789克隆 EH12.1 (also known as EH12) (RUO)，参考Naive CD4+T设门的话，CD3+PD-1+也把PD-1设到10^3处？补偿的话，是单染后，beckman 自动计算的补偿，从补偿图看没啥问题。