人骨髓血单个核细胞分离

wangsn20

想对人骨髓血中的MDSC进行染色，但是之前没有做过骨髓的，想请教ficoll骨髓时的具体转速应该是多少呀？如果有具体步骤就更好啦

niwanmao

参见：PMBC提取的经验及问题讨论
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-827-1-1.html
(出处: 流式中文网)


里面有各方面的经验

wangsn20

niwanmao 发表于 2024-8-13 10:28
参见：PMBC提取的经验及问题讨论
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-827-1-1.html
(出处: 流式中文网)

老师，俺想请教骨髓的

niwanmao

wangsn20 发表于 2024-8-13 12:27
老师，俺想请教骨髓的

一样的

Fusca

骨髓处理有一个小细节和外周血不同：人骨髓中含有一定量脂肪，特别是老年人样本。建议处理前先4度300g离心5分钟，待血细胞沉降后取一块消毒的棉球或无菌棉棒伸进管内，把浮在上方的脂肪（颗粒状或块状）尽量擦掉。随后再使用外周血ficoll的标准提取法即可。如不做这一步可能会影响最终单个核细胞沉降层的完整性或者吸取沉降层时带上脂肪，导致细胞损失。

另外，骨髓血中的免疫细胞浓度远大于外周血，建议PBS1:1稀释，并且多加ficoll，要用稀释后的3倍体积左右效果才好。

wangsn20

Fusca 发表于 2025-3-4 21:25
骨髓处理有一个小细节和外周血不同：人骨髓中含有一定量脂肪，特别是老年人样本。建议处理前先4度300g离心5 ...

感谢感谢！！太详细了！！