Fc阻断后需要洗涤吗？

niwanmao

Fc 阻断的目的
免疫细胞表面的 Fc 受体(FcγRs)可以非特异性地结合抗体的Fc段，导致背景染色增高和假阳性结果。Fc阻断剂用于中和这些受体，防止非特异性结合。

Fc阻断后的洗涤
在使用商品化Fc阻断剂孵育样本后是否需要洗涤,取决于具体的实验方法和所进行的染色类型。
- 表面染色: 如果进行表面染色(细胞表面标志物染色)，通常不需要在Fc阻断后洗涤细胞（参见https://www.bdbiosciences.com/en ... s/fc-block-reagents）。但是也有用户在使用 Fc 阻断后进行洗涤（见https://medicine.yale.edu/immuno/flowcore/protocols/analysis/）
- 细胞内染色: 在细胞内染色过程中，特别是在固定和破膜后，一些方法建议在 Fc 阻断后进行洗涤。这是因为未结合的 Fc 阻断剂可能会干扰细胞内染色过程或破膜步骤，可能导致染色效果不佳或背景增高。

此外，建议查看购买的Fc阻断剂和染色抗体厂家提供的具体步骤，他们通常会为自己的产品进行步骤优化。

如果在染色过程中发现背景高或其他问题，可以尝试洗涤和不洗涤两种条件，看哪种方法能为特定应用提供更好的结果。

adaliang1234

倪老师，不经常见您参加全国的流式会议,很期待您的风采

niwanmao

adaliang1234 发表于 2024-8-29 08:40
倪老师，不经常见您参加全国的流式会议,很期待您的风采

有参加几个主流的会的