绝对计数微球的原理

zzzlll. · 发表于 2024-8-20 08:58:10

想问一下大家，绝对计数微球是什么原理呀，自己搜了一下总感觉模模糊糊的，以及具体怎么操作呢？想计数T细胞的数量

许诺 · 发表于 2024-8-20 09:08:37

原理就是根据微球与目标细胞的比值算出细胞数，因为试管内微球总量是知道的

zzzlll. · 发表于 2024-8-20 09:11:12

那是微球上标记了荧光素吗，是fsc/ssc圈门还是下一级的荧光圈门呢

zzzlll. · 发表于 2024-8-20 09:17:37

还有一个问题是，绝对计数微球要选择与目标细胞相同直径的微球吗

11111 · 发表于 2024-8-20 09:25:24

微球荧光与细胞抗体的荧光有明显差别，fsc/ssc圈门哪都行，大小一般较小，不需要跟细胞保持一致

许诺 · 发表于 2024-8-20 12:02:39

本帖最后由许诺于 2024-8-20 12:31 编辑

大小要与细胞不一致才对，正常BD家的绝对计数管里的也就是不一致的，本来通过前侧向也能读的，我记得我做的时候那PerCP筛淋巴的时候，颗粒在这个染料的通道上荧光有的而且也强的

zzzlll. · 发表于 2024-8-22 15:47:42

许诺发表于 2024-8-20 12:02
大小要与细胞不一致才对，正常BD家的绝对计数管里的也就是不一致的，本来通过前侧向也能读的，我记得我做的 ...

好的好的明白了

小迪 · 发表于 2024-9-5 00:36:05

原理就是小时候学的那个，用一桶已知数量的红球扔到池塘里，混匀后过段时间捞一网子，看看里面有多少个红球多少条鱼，就可以估算整个池塘里有多少鱼

zzzlll. · 发表于 2024-9-5 15:37:46

小迪发表于 2024-9-5 00:36
原理就是小时候学的那个，用一桶已知数量的红球扔到池塘里，混匀后过段时间捞一网子，看看里面有多少个红球 ...

很直观！感谢

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