纯化培养的间充质干细胞marker相关问题

HGPWDLH

这是我们纯化培养的毛囊间充质干细胞，需要测marker的时候犯难了。图中黄色图标的地方需要圈进去分析marker表达情况吗？

yuqing_X

不用把左下角圈进去，但是E1门可以圈大一些吧

bslhk

不用，把FS/ss电压调大一点，跟碎片分开一点就行。

HGPWDLH

yuqing_X 发表于 2024-9-5 17:14
不用把左下角圈进去，但是E1门可以圈大一些吧

按理来说我们纯化培养的msc，是需要纳入所有收集的细胞类颗粒的，来看msc的比例，这小部分细胞为啥不需要纳入呢

HGPWDLH

bslhk 发表于 2024-9-5 17:17
不用，把FS/ss电压调大一点，跟碎片分开一点就行。

为啥不用啊，这是我们很纠结的额问题，这一小部分细胞我们甚至分选过，然后培养，然后测marker，图还长这样。我们的仪器不能调节fsc-ssc电压，如果看细胞纯化细胞中msc的占比这一部分为啥不用纳入呢

我是超人我怕啥

HGPWDLH 发表于 2024-9-5 17:29
为啥不用啊，这是我们很纠结的额问题，这一小部分细胞我们甚至分选过，然后培养，然后测marker，图还长这 ...

1.我觉可以把分选完的计数看下活率
2.我认为左下角是样本中的碎片和小颗粒物质，所以不用圈进去你正常的细胞里
3.另外建议增加一个死活

HGPWDLH

我是超人我怕啥 发表于 2024-9-6 15:24
1.我觉可以把分选完的计数看下活率
2.我认为左下角是样本中的碎片和小颗粒物质，所以不用圈进去你正常的 ...

死活染色之前是有添加的，现在的圈门位置就是活细胞的经验位置。现在左下角的是碎片还是小颗粒，这些小颗粒是细胞的话，会影响我们培养细胞的纯度，需不需要纳入统计范畴，这个很头疼

niwanmao

HGPWDLH 发表于 2024-9-6 16:51
死活染色之前是有添加的，现在的圈门位置就是活细胞的经验位置。现在左下角的是碎片还是小颗粒，这些小颗 ...

碎片是不应该圈的
你可以通过密度分布确认分界

h1030506

左下角是比较明显的碎片吧，圈进去会影响结果的。E1的门才是应该圈大一些的吧。

HGPWDLH

niwanmao 发表于 2024-9-6 20:40
碎片是不应该圈的
你可以通过密度分布确认分界

不确定是不是碎片