多克隆抗体能做isotype control吗？

WYLLQ

请问一下各位，多克隆抗体能做isotype control吗？

niwanmao

多克隆抗体通常不适合用作同型对照。原因如下：

• 同型对照用于确保流式细胞术或其他免疫检测中的染色是针对靶抗原的特异性结合，而不是由于抗体恒定区（Fc区）的非特异性结合或其他背景干扰。同型对照应在物种、同型及荧光素偶联物等方面与实验抗体相匹配，但缺乏对靶抗原的特异性。
• 多克隆抗体是识别同一或不同抗原上多个表位的抗体混合物。这种多样性可能导致与多个非预期靶点的结合，因此不适合作为同型对照使用。
  

良好同型对照的特征：
- 单克隆抗体，其物种、同型及Fc片段结构应与实验抗体一致。
- 非特异性结合：同型对照不应识别所检测细胞上的任何特异性表位，以准确评估其背景染色。

建议：
- 选择无已知特异性的单克隆抗体作为同型对照。
- 确保同型对照与实验抗体使用完全相同的荧光染料（或其他标记分子）。

因此，如果实验对背景控制要求严格，建议选择一个合适匹配的单克隆抗体，而非多克隆抗体。