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[标本处理] 请问如何看这个CD45的滴定结果图

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发表于 2024-9-23 21:04:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
本帖最后由 cenzhikang 于 2024-9-23 21:22 编辑

我将小鼠外周血取出至EDTA抗凝管后,使用2%FBS/PBS稀释三倍,后每管100 ul加入到EP管中,加入不同浓度的抗体4度避光孵育30min,结束后加入1 ml 红细胞裂解液 常温孵育10min, 500g 4度离心5min 吸取红色上清后加入100 ul PBS上机检测,每管获取10000个events,下面是滴定的结果,数据是根据网上的教程用flowjo的染色指数插件自动计算的,请问这个结果有参考价值吗,我这个没有阴性细胞群对照,请问该如何分析结果,谢谢各位大佬解答
我的疑惑如下:
1. 我是先孵育抗体再裂红,虽然样本来源一致,裂红操作一致,但是肯定或多或少都会有差异,这样的结果可以对比吗
2. 如果先裂红再做滴定,那根据滴定的结果最后实际染色的时候也是要按照先裂红再染色这样的操作进行吗,我怕因为增加离心次数而导致细胞丢失过多

SI.png

2.fcs

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抗体稀释2倍

4.fcs

1.08 MB, 下载次数: 3

抗体稀释4倍

8.fcs

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抗体稀释8倍

16.fcs

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抗体稀释16倍

32.fcs

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抗体稀释32倍

64.fcs

735.23 KB, 下载次数: 3

抗体稀释64倍

no antibody.fcs

1.08 MB, 下载次数: 3

未加抗体

组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2024-9-24 07:40:58 | 显示全部楼层
从图上看1:16最佳

这个滴定结果,与先裂红还是后裂红无关的
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2024-9-24 09:02:24 来自手机 | 显示全部楼层
谢谢老师 太感谢了
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
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