散点图细胞不稳定怎么回事？

chujindong

这几天做流式发现有时散点图上的细胞总是不稳定。正常情况下都是在aquire之后，散点图中的细胞一个个出现，但是现在aquire之后细胞时隐时现，且变化非常快，就像是电视机上的雪花一样。但若是record的话，还是可以看到细胞分群的。不知道这是怎么回事，请大家指导一下。

niwanmao

chujindong 发表于 2011-10-17 16:29

                               
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这几天做流式发现有时散点图上的细胞总是不稳定。正常情况下都是在aquire之后，散点图中的细胞一个个出现， ...

是不是就是取的时候，一开始细胞在最左边，数秒钟之后，细胞向右边漂移？
如果是这样的，一般都提示流动室或管道比较脏。

chujindong

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这倒没注意，因为显示的细胞比较少，没注意有什么规律。无论如何，先试试清洗管道后再说吧，先排除这个可能性。

chujindong

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上机的时候看了一下，感觉没有规律。细胞在漂，用2%漂白粉吸取5分钟后再做，没有什么改善，计数3000左右看了一下，跟以前管道脏还不一样，图上无明显规律。这几天都这样。明天再做一次看看，是不是细胞的问题。

haven_t

可以用时间作为其中一个参数作散点图,就可以知道获取时的变化了。可能是有点堵,或者样品有团块,又或者是鞘液的过滤器有问题

chujindong

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这么说来最可能是液流系统的问题了。管道堵得话怎么解决呢？昨天刚做的时候确实堵，让机器自身反复冲洗了4次才能获取细胞。我昨天用漂白粉跑了5分钟之后再做的，是不是解决了这个问题呢？

niwanmao

chujindong 发表于 2011-10-18 08:44

                               
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这么说来最可能是液流系统的问题了。管道堵得话怎么解决呢？昨天刚做的时候确实堵， ...

除了反冲，最好进行一次月维护保养。
我不知道你们这个机型怎么做，calibur是把鞘液和上样管都换成漂白水，然后把鞘液过滤器旁路掉，跑30分钟，然后换成蒸馏水，再同样跑30分钟，最后把鞘液过滤器恢复原位。

chujindong

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机器我也不是太了解，比如这个鞘液过滤器我就找不到在哪。
我刚刚发现问题出在哪了，不是液流系统的问题，也不是细胞的问题。是显示细胞数目的问题。不知道谁动了软件上的一个设置：events to display.意思是获取过程中图上显示500个细胞，我想应该是这个出问题了，一张图里只显示500个细胞，那这些细胞肯定就会闪一下就消失了。我把它改成5000个或10000个，就能很清楚的看到细胞分群。实在很无语啊。

niwanmao

chujindong 发表于 2011-10-18 11:03

                               
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机器我也不是太了解，比如这个鞘液过滤器我就找不到在哪。

哈哈。这是显示细胞少的缘故了，说明取的时候没有发生漂移现象。日常生活中也经常会出现这类情况的

haven_t

chujindong 发表于 2011-10-18 08:44

                               
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这么说来最可能是液流系统的问题了。管道堵得话怎么解决呢？昨天刚做的时候确实堵， ...

我们买了两种冲洗液，第一种成分应该是表面活性剂，第二种是次氯酸钠，最后用水冲。
不知道您仪器的型号，前段时间我们鞘液过滤器确实是出问题了，获取时很不稳定，过滤器在那个鞘液车的后面。
不过现在问题解决了就好。