求助！！FITC染色后，细胞均发生偏移

wyhwyh

上图-为正常细胞未进行染色，上图UN-1是正常细胞进行了FITC和PI染色，想请问一下为什么FITC不染色的细胞在3次方左右，一旦染色无论是正常细胞还是感染细胞都向右偏移？
还有一个问题我的这两个图是不是说明细胞消化过了？

wyhwyh

图片在这里！

niwanmao

wyhwyh 发表于 2024-10-9 18:04
图片在这里！

这是流式中很常见的，因为不染FITC（就是空白组），是不能用于设置十字门的，因为不染抗体，只意味着空白背景，无法反映出非特异性结合背景、无法反映出荧光渗漏的背景

wyhwyh

niwanmao 发表于 2024-10-9 20:22
这是流式中很常见的，因为不染FITC（就是空白组），是不能用于设置十字门的，因为不染抗体，只意味着空白 ...

还想继续请教一个问题，我之前的十字门是根据正常的且未染色的细胞去画的，是不是应该按照两个阳性单染管去画十字门？

niwanmao

wyhwyh 发表于 2024-10-9 21:47
还想继续请教一个问题，我之前的十字门是根据正常的且未染色的细胞去画的，是不是应该按照两个阳性单染管 ...

单染的话，另一个通道仍然是空白，不一定可以反映真实背景

如果你做的是Annexin V FITC和PI，那么阳性凋亡对照，会分成很好的3-4个群体，直接按照分群设门即可