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OMIP-103:一个35个标记的成像质谱方案,用于联合检测人福尔马林固定石蜡包埋的肠组织

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发表于 前天 21:48 | 显示全部楼层 |阅读模式

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为了深入研究病毒病原体感染过程中组织内的变化,实现病原体与宿主免疫细胞相互作用的原位可视化十分关键。尽管已有基于抗体的方法用于检测特定病毒病原体,RNA原位杂交技术(RNA-ISH),尤其是RNAscope,因其更高的特异性和灵敏度,在区分单个病毒颗粒方面展现出独特优势。然而,目前将RNA-ISH与主要检测蛋白标记物的高维成像技术,如多重免疫荧光细胞术(IMC)结合使用的研究相对较少。

由于同时检测病毒RNA和免疫细胞群体很有必要,Hu K等人介绍了一种优化的IMC方案,该方案可识别人类福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)肠组织中的B细胞、T细胞、单核吞噬细胞和HIV RNA。

方案如下表,为了检测HIV RNA,作者设计了一种针对HIV转录组的定制RNAscope探针,并通过免疫荧光验证了该探针的特异性。RNAscope被纳入IMC染色工作流程,实现了HIV RNA与其他蛋白标记物的原位共检测。
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