CD45亚群数量很少

sttstt

                               
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我发现样本中CD45阳性的细胞波动很大，收了七十万的细胞和十万的细胞的样本CD45阳性的细胞数量区别不是很大！朋友们又遇到这种情况嘛？是我抗体孵育的问题还是正常现象呢？

niwanmao

这跟很多因素有关：
1、红细胞裂解的情况，如果红细胞没裂干净，通常同样的事件数，CD45+数量相差很大。
2、仪器上设置的收集事件是全部？还是设置为某个Gate内的？这也关系到最终的细胞数量

如果你想CD45+门内事件数一致，可以在CD45+位置圈一个门，命名为WBC，然后在软件中设置为WBC收集到10万个停止，就可以了

我是超人我怕啥

1.条件和样本是否一致
2.做的是绝对计数，还是单纯看比例

sttstt

niwanmao 发表于 2024-11-15 08:18
这跟很多因素有关：
1、红细胞裂解的情况，如果红细胞没裂干净，通常同样的事件数，CD45+数量相差很大。
2 ...

老师，我用的淋巴细胞分离液提取的pbmc做的流式，总细胞收了七十万个就停止了，没设置CD45+亚群收多少

sttstt

我是超人我怕啥 发表于 2024-11-15 11:00
1.条件和样本是否一致
2.做的是绝对计数，还是单纯看比例

你好，条件和样本是一致的，给小鼠设置了三个平行对照，这三个平行对照差异不是很大，但是跟之前的数据相差很大，只是单纯的统计了免疫细胞各亚群的比例

niwanmao

sttstt 发表于 2024-11-15 15:22
老师，我用的淋巴细胞分离液提取的pbmc做的流式，总细胞收了七十万个就停止了，没设置CD45+亚群收多少 ...

可以看一下图，如果是因为阈值设置过低导致碎片信号过高，则需设置CD45+群体收集数