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[标本处理] 抗凝管的使用

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发表于 5 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
做全血的流式,一般每次杀4只老鼠,除了取血还要取其他组织,所以每只老鼠的操作时间大概在15-20分钟左右,然后进行下一只老鼠。

但是有时会有几个抗凝管里的血液会出现凝固现象,之前的操作如下:


1. 从小鼠胸腔用注射器抽取血液后 (①注射器是普通1ml注射器,没有用抗凝剂覆盖注射器内壁,也没有使用针头。②一般能得到500ul-750ul的血,很难取到1ml),立刻注入到EDTA tube里 (EDTA tube是直接买的,容量1.3ml)
2. 来回倒置几次,放在室温下
3. 取其他组织,所有的操作完成后,进行下一只老鼠

4. 所有老鼠完成后,再用RBC lysis buffer进行下一步实验...

有的抗凝管血液没有凝固,有的凝固了,请问是哪一步操作有问题吗,非常感谢~

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
应该还是抗凝剂不足的缘故,这些抗凝管内抗凝剂是液体的还是涂布在管壁看不见?其实可以自己配制EDTA抗凝剂的,更稳妥一些,至少保证抗凝剂量
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-11-25 08:38
应该还是抗凝剂不足的缘故,这些抗凝管内抗凝剂是液体的还是涂布在管壁看不见?其实可以自己配制EDTA抗凝剂 ...

谢谢老师回复~
我们买的抗凝管的K3 EDTA是以喷雾涂层形式存在。官网上写的volume of work是1.3ml,一般我们也就只能取500-750ul。(https://www.sarstedt.com/en/prod ... roduct/41.1395.005/

我们之前即使取同样量的血液,有的血液就凝固了,有的没有凝固。不知道哪里出现了问题。

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
瓜瓜999 发表于 2024-11-25 16:03
谢谢老师回复~
我们买的抗凝管的K3 EDTA是以喷雾涂层形式存在。官网上写的volume of work是1.3ml,一般 ...

跟人一样,小鼠血样也有个体差异

首先确保是否真的充分混好了,如果确保充分混匀了还这样的话只能自己配制一些EDTA溶液去额外加了
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 楼主| 发表于 前天 03:13 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-11-25 16:21
跟人一样,小鼠血样也有个体差异

首先确保是否真的充分混好了,如果确保充分混匀了还这样的话只能自己配 ...

谢谢老师的建议~
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发表于 前天 23:42 来自手机 | 显示全部楼层
我们之前实验也遇到血凝了的情况,当时师兄说的是还需要考虑取血的时候尽量避免碰到鼠毛发、胡须的情况,导致外源性凝血。

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 楼主| 发表于 10 小时前 | 显示全部楼层
mark 发表于 2024-11-27 23:42
我们之前实验也遇到血凝了的情况,当时师兄说的是还需要考虑取血的时候尽量避免碰到鼠毛发、胡须的情况,导 ...

也有可能,下次取血的时候我注意一下,谢谢提醒~
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