检测B-ALL的CD20表达率，流式细胞术和免疫组化的一致性如何？原因为何？

niwanmao

将利妥昔单抗加入到标准诱导治疗中是 CD20阳性成人B细胞急性淋巴细胞白血病 (B-ALL) 常见的做法。根据GRAALL-2005 试验，这个方案在2年无事件生存率上表现出优势。 因此，准确确定CD20状态是非常重要的。

在 GRAALL-2005 中，阳性定义为基于流式细胞术 (FCM) 的白血病细胞中 CD20 表达的 >20%。CD20表达率也可以通过对骨髓穿刺切片进行免疫组化 (IHC) 来评估；

Grigg S等人研究了分析成人B-ALL中CD20表达率时 FCM 和 IHC 之间的不一致情况。这种现象在成熟B细胞非霍奇金淋巴瘤中的不一致率为 22% 。 作者回顾了 2017 年 7 月至 2024 年 6 月期间在彼得·麦考伦癌症中心和皇家墨尔本医院的所有 B-ALL 病例。患者的基线 CD20表达率由 FCM 和 IHC 两者评估，CD20 阳性定义为淋巴母细胞上>20%的抗原表达。在流式分析中以T细胞作为内部阴性对照。2017 年至 2018 年使用的 FCM 抗体为 CD20-FITC（克隆 L27） ，2018 年及以后使用的抗体为 CD20-ECD（克隆 B9E9）。 IHC 染色使用 CONFIRM 抗 CD20 抗体（克隆 L26）。

研究共纳入79名患者，其中61例为新发病例，18例为复发病例。中位年龄为46岁（范围17-81岁），女性占42%。18例（23%）病例为费城染色体阳性。CD20状态和不一致率见下表，在79例中观察到不一致10例（13%），包括4例FCM-/IHC+和6例FCM+/IHC-病例。


FCM+/IHC- 不一致的确切机制尚不确定。虽然无法排除前分析因素（如穿刺质量和组织处理），但值得注意的是，在所有6个 FCM+/IHC- 不一致的案例中，原始细胞群体的平均荧光强度 (MFI) 相较于成熟B细胞的内部阳性对照较弱，但仍然大于我们的内部阴性对照0.3 log，这说明FCM 在检测 CD20 表达方面比 IHC 更敏感。

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