使用PMA刺激T细胞

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  想请教各位一个问题：在我们使用流式细胞术检测肝脏组织Th17细胞时，由于表面抗原的非特异性，更多使用的方案是使用PMA刺激，进而通过CD3+CD4+IL17+来标记Th17细胞，根据PMA的原理来看的话主要是激活细胞内Protein kinase C(PKC) ，引起下游众多蛋白激酶的磷酸化，形成级联反应，导致多种蛋白的表达引起细胞的活化。我理解的是，与对照组相比的模型组的Th17的增多，实际上是相同条件下模型组t细胞更容易活化为Th17，是不是也不能直接说明模型组中Th17细胞比例增多，但是我看大部分文献的描述中，通过CD3+CD4+IL17+来标记Th17细胞如果在模型组中比例增多，下的定义是模型组中Th17细胞比例增加，对此是否不够准确呢？恳请大家指导，万分感谢。

niwanmao

从目前发现的文章来看，大多数都是这样表述的

当然，你说的没错，更准确的解读应为：
"具有Th17功能特征的CD4+ T细胞比例增加"
或
"可被活化为Th17表型的T细胞比例增加"

必要的时候，可以：
- 联合检测RORγt
- 评估其他Th17相关因子
- 细胞因子分泌动力学变化

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niwanmao 发表于 2024-12-5 13:45
从目前发现的文章来看，大多数都是这样表述的

当然，你说的没错，更准确的解读应为：

谢谢老师的解答，目前我们的动物实验已经结束，您说的联合检测RORγt,，是通过pcr吗？或者可以通过Elisa检测肝组织的IL17来进一步为Th17细胞的比例增加提供证据支撑呢？

niwanmao

用户被占用 发表于 2024-12-5 15:29
谢谢老师的解答，目前我们的动物实验已经结束，您说的联合检测RORγt,，是通过pcr吗？或者可以通过Elisa ...

RORγt是核内转录因子，做流式的时候同时标记的

测肝组织粉碎液的IL-17，没有做到单细胞水平，我不认为比刺激好

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niwanmao 发表于 2024-12-5 15:57
RORγt是核内转录因子，做流式的时候同时标记的

测肝组织粉碎液的IL-17，没有做到单细胞水平，我不认为 ...

好的，谢谢老师解答