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[试剂耗材] 流式抗体该怎么使用?

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
我目前了解到三种流式抗体使用方式

1、滴定以后按照效价,例如1/128,每次使用前用FACS溶液把抗体按照1/128稀释,每个样品加入10微升稀释液。
2、滴定,按照效价使用,控制每个样品抗体体积30微升,每个抗体按照比例加入,少的用PBA补齐。
3、不滴定,所有抗体按照1/200使用,例如控制每个样品抗体体积一共40微升,每个抗体取0.2微升,少的用PBS补齐。

方法1是我之前的课题组一直以来的用法,染色效果没有明显问题,方法3是目前课题组的用法,但是他们觉得方法1很浪费抗体,我也不理解方法3的合理性在哪里,方法2是听说的另外一个课题组的用法。

请问各位哪一种更为合理和适用?

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
通常滴定的体积100ul比较常见

用100ul滴定抗体用量之后,明确多少ul使得信噪比最高,后面就用多少ul
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