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[试剂耗材] PMA和BFA

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发表于 2024-12-26 13:46:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
想请问下做流式胞内破膜,染色时,都需要加PMA和BFA?还是有的要加,有的不需要?

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发表于 2024-12-26 13:56:29 | 显示全部楼层
PMA和离子霉素、BFA,是否要加,是看你检测的靶标

对于流式细胞术,某些细胞内标记物的检测需要用PMA、离子霉素和BFA进行特定处理。以下是详细的说明:

需要PMA、离子霉素和BFA进行检测的细胞内标记物:
- 细胞因子(例如,IFN-γ、TNF-α、IL-2): 这些是分泌性蛋白,在静息细胞中通常含量很低。
- 趋化因子: 与细胞因子类似,这些分泌性蛋白需要被诱导并阻止分泌才能在细胞内被检测到。
- 存在于细胞器和囊泡中的分泌蛋白



通常不需要PMA、离子霉素和BFA的细胞内标记物:
- 核蛋白: 这些蛋白已经位于细胞核内,因此不需要刺激。例如,转录因子位于细胞核内,可以通过适当的固定和破膜处理进行检测。
- 大多数本身就存在于细胞质的蛋白
- 某些活化标记物: 一些细胞内活化标记物,如CD69,在细胞受到刺激后表达,需要PMA和离子霉素,但不需要BFA
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 楼主| 发表于 2024-12-26 14:12:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-12-26 13:56
PMA和离子霉素、BFA,是否要加,是看你检测的靶标

对于流式细胞术,某些细胞内标记物的检测需要用PMA、离 ...

我这边看到一个产品,是thermo的IL-4,需要破膜,但未说要加PMA和BFA。
货号为 17-7041-82
这块就有点懵了

还有就是一个靶标为CD79A
https://www.thermofisher.cn/cn/z ... noclonal/12-0792-42
正常情况是不需要破膜,但是厂家给出的建议是需要破膜

感觉有些小绕
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 楼主| 发表于 2024-12-26 14:13:51 | 显示全部楼层
huxin 发表于 2024-12-26 14:12
我这边看到一个产品,是thermo的IL-4,需要破膜,但未说要加PMA和BFA。
货号为 17-7041-82
这块就有点懵 ...

还有就是有没有哪个软件可以辅助判断靶标是分泌性,胞内的,核内的,活化标记物
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发表于 2024-12-26 14:33:43 | 显示全部楼层
huxin 发表于 2024-12-26 14:12
我这边看到一个产品,是thermo的IL-4,需要破膜,但未说要加PMA和BFA。
货号为 17-7041-82
这块就有点懵了 ...

IL-4需要刺激

CD79a是胞内的标记,我们临床上经常做
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