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发表于 2024-12-26 13:56:29
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PMA和离子霉素、BFA,是否要加,是看你检测的靶标
对于流式细胞术,某些细胞内标记物的检测需要用PMA、离子霉素和BFA进行特定处理。以下是详细的说明:
需要PMA、离子霉素和BFA进行检测的细胞内标记物:
- 细胞因子(例如,IFN-γ、TNF-α、IL-2): 这些是分泌性蛋白,在静息细胞中通常含量很低。
- 趋化因子: 与细胞因子类似,这些分泌性蛋白需要被诱导并阻止分泌才能在细胞内被检测到。
- 存在于细胞器和囊泡中的分泌蛋白
通常不需要PMA、离子霉素和BFA的细胞内标记物:
- 核蛋白: 这些蛋白已经位于细胞核内,因此不需要刺激。例如,转录因子位于细胞核内,可以通过适当的固定和破膜处理进行检测。
- 大多数本身就存在于细胞质的蛋白
- 某些活化标记物: 一些细胞内活化标记物,如CD69,在细胞受到刺激后表达,需要PMA和离子霉素,但不需要BFA |
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