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1.包含有单核/巨噬细胞的样本都需要用Fc blocker？（提取的浸润免疫细胞，但是只测T细胞的话）
答：只要你检测的靶标分群明显，无需Fc Blocking。 如果分群不清的抗原，且干扰因素主要是由非特异性结合引起的，那么无论是单核/巨噬上的还是T、B、NK上的，均需进行Fc Blocking
2.单染管要加活死吗？然后用同种荧光素的话可以只用一种单染做单染管，有这个荧光素的抗体可以只用这一管调荧光电压和补偿吗（比如CD3 APC，Ccr2 APC，可以只用CD3 APC做单染，然后Ccr2 APC用CD3 APC的单染数据吗）
单染管不需要加死活染料，但需要用状态较好且该标记物阳性群分群明显的样本。 像你这里说的APC通道，可以用CD3替代 CCR2， 但如果是串联染料就不行。
3.强表达用低亮度的结合荧光素的话会对后面分群造成影响吗（单核细胞CD11b用APC/Cy7 ，Ccr2用APC，这样Ccr2会不会产生假阳性），可以用FMO对照排除这种影响吗
4.如果用到结合荧光素的话，应该给上级标志物用还是下级标志物用好呢（比如CD11b，Ly6c只用PE和PE-Cy7的话，会不会也导致假阳性）
没看懂题目意思，你指的是串联染料？ 另外你这里所说的下级标志物和上级标志物是什么意思？
5.活死染料我选择7aad会溢漏到别的通道，但是圈的是7aad阴性群，那么对别的通道影响是不是不大呢？
这么理解也没错^_^，但你得小心其它通道对7-AAD的渗漏，造成7-AAD假阳性的被你排除掉哦
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