流式小鼠样品的冻存

木杉丶

买的抗体没到，需要取小鼠腹股沟淋巴结、胸腺、骨髓组织做流式，那这些样品进行冻存后再检测对结果影响大么？有人说可以把样品剪碎再用细胞冻存液梯度冻存这是可行的么？如果可以细胞冻存液的量该怎么加？

niwanmao

冻存后细胞存活率降低（通常降低20-30%），某些表面标志物表达可能发生轻微改变，细胞自发荧光可能略有增加，但采用正确的冻存方法，影响可控制在可接受范围内

具体到样本类型，骨髓细胞的冻存耐受性最好，但是淋巴结和胸腺相对较差

木杉丶

niwanmao 发表于 2025-1-8 09:25
冻存后细胞存活率降低（通常降低20-30%），某些表面标志物表达可能发生轻微改变，细胞自发荧光可能略有增加 ...

老师 我靶向CD19 CD20 CD138这些，如果冻存的话是先制成单细胞悬液再冻存还是原样品冻存好些？一般来说可以冻存多久啊？

niwanmao

木杉丶 发表于 2025-1-8 16:44
老师 我靶向CD19 CD20 CD138这些，如果冻存的话是先制成单细胞悬液再冻存还是原样品冻存好些？一般来说可 ...

制成单细胞悬液会好一些，骨髓样本通过Ficoll提出单个核细胞可以冻蛮多年的，但是其它组织解离的单细胞保存时间我不太清楚