不同时间收集的标本流式设门必须一样吗

xianluobo

倪老师和各位老师好，我收集了某疾病患者外周血检测NK细胞某标志物的表达情况，和健康人作对照，这个标志物在流式上没有明显的分群，但是能看到峰的移动。
由于发病率低，我一次只能收到1-2名患者，所以应该每次都用FMO对照确定圈门位置吗？这样同批次检测血样的门位置是一样的，不同批次的门位置不同，最后用阳性细胞百分比表示结果，会不会被审稿人质疑？
（我想如果不圈门直接用平均荧光强度表示的话，是不是很受每次孵育操作和仪器状态的影响造成结果偏差）
谢谢老师的解答~

niwanmao

没有明显分群，并且背景主要来源于荧光渗漏的话，还是建议每次都用FMO对照确定分群

如果Fc结合背景比较明显，还需要加上Fc阻断

每次的设门位置最多只会有少许偏离，这是承认的，因为你有对照在，没有人能够质疑。

如果偏离大，那就是仪器出问题，此时本身就应该质疑结果真实性的