科研实验测蛋白，什么时候用流式细胞术，什么时候用Western Blot

niwanmao

流式细胞术和Western Blot都是科学研究中用于检测蛋白质的技术，但原理不同，提供的信息也不同，所以需要根据自己的需求进行选择。

流式细胞术

流式细胞术检测蛋白质的优势：
- 单细胞分辨率： 在单个细胞层面分析蛋白质表达，找出群体中可能被忽略的异质性。
- 高通量： 能够快速分析每份样本中的数百万个细胞，输出具有统计学意义的可靠数据。
- 多参数分析： 可以在同一细胞上同时测量多个参数（多种蛋白质或核酸指标、细胞大小、颗粒度）。
- 定量： 每个细胞蛋白表达水平均可半定量或绝对定量。
- 细胞分选能力： 可分出特定的细胞群体以进行进一步研究

何时使用流式细胞术：
- 需要分析单个细胞中的蛋白质表达及其变化
- 需要根据蛋白质标志物来区分不同的细胞类型或亚群
- 需要根据蛋白质表达水平进行高通量筛选
- 需要进行多参数分析

Western Blot

Western Blot的优势：
- 蛋白质大小信息： 提供目标蛋白质的分子量信息。
- 蛋白质修饰检测： 可以检测到改变大小或抗体结合的蛋白质修饰。
- 特异性： 由于抗体-抗原相互作用和大小分离，在复杂混合物中检测目标蛋白的特异性较高。
- 半定量分析： 比较样本之间蛋白质的相对丰度。
- 是分子生物学实验中一种标准且经过充分验证的方法。

何时使用Western Blot技术：
- 需要确定蛋白质的分子量时
- 需要比较不同实验条件或大量样本之间蛋白质水平的相对变化时
- 需要检测蛋白质修饰时（例如，磷酸化、剪切）
- 作为其他蛋白质检测结果的确认方法。

一张表概括

麦小光

赞一个，我也从我自己的亲身经验来说，有机会做流式一定上流式，体系稳定的情况下，结果趋势都很稳定，做起来很有信心。WB跑的时候结果太玄学，做来作曲有时候都在产生自我怀疑了。