HL60细胞诱导分化

yundou

求问关于HL60细胞诱导分化中性粒细胞的方案有没有参考的文献，网上搜到的好多都是九十年代的文献，主要是最后的检测指标，好多都是用染色来判断，感觉有点主观，有没有什么流式指标。另外这个实验成功率如何？

niwanmao

有一篇2021年的，分数不高，但写的比较详细，可以参考一下。成功率应该跟很多因素有关

Guo, Y., Gao, F., Wang, Q., Wang, K., Pan, S., Pan, Z. ... Zhao, D. (2021). Differentiation of HL‑60 cells in serum‑free hematopoietic cell media enhances the production of neutrophil extracellular traps. Experimental and Therapeutic Medicine, 21, 353.   https://doi.org/10.3892/etm.2021.9784     IF: 2.4 Q3

里面提到：
HL-60细胞在RPMI-1640培养基中培养，添加10%胎牛血清或X-VIVO™ 15培养基，在37℃、5%CO2的湿润环境中培养。每三天传代一次，实验仅使用传代不超过15次的细胞。使用ATRA（1 µmol/l）或DMSO（1.25%）诱导HL-60细胞分化。通过检测CD11b、CD16和CD66b的表达来评估HL-60细胞的分化。

CPUSnape

试过，1uM的ATRA，诱导4day，细胞起始密度2e5，day2传代一次，流式检测CD11b表达，另外通过瑞恩吉姆萨染色观察核形态来判断。

CPUSnape

CPUSnape 发表于 2025-2-24 10:28
试过，1uM的ATRA，诱导4day，细胞起始密度2e5，day2传代一次，流式检测CD11b表达，另外通过瑞恩吉姆萨染色 ...

第二次传代调整密度回到2e5，一般2天长到1e6左右，细胞活率不怎么改变，培养基要注意，用的是IMDM培养基加20%FBS