小鼠肝脏Treg流式检测求助

沃兹姬

请问各位老师，小鼠肝脏Treg流式检测常用panel是什么呢，如果我用percoll分离LNPC后可以不加CD45或CD3，只用CD4+CD25+Foxp3+圈门吗

niwanmao

尽管Percoll可以富集非实质细胞，但并不能完全去除非免疫或非T细胞群体。因此，不加CD45或CD3可能会可能存在非T细胞事件或非白细胞的污染

小鼠肝脏研究还是建议：
- 死活染料
- CD45
- CD3
- CD4
- CD25和Foxp3

有些可能还加上CD127。

沃兹姬

niwanmao 发表于 2025-3-21 07:46
尽管Percoll可以富集非实质细胞，但并不能完全去除非免疫或非T细胞群体。因此，不加CD45或CD3可能会可能存 ...

感谢倪老师。倪老师，关于这个配色的话我还有问题，就是目前Tcell panel用的是
CD45 AF700
CD3  APC
CD8 FITC
CD4 PE
如果我后续只加CD25和Foxp3两个指标的话，那么CD25 PECY7，Foxp3 BV421这样配色是否合理。pecy7作为串联染料会不会容易在固定这一步发生断裂淬灭呀

niwanmao

沃兹姬 发表于 2025-3-21 11:05
感谢倪老师。倪老师，关于这个配色的话我还有问题，就是目前Tcell panel用的是
CD45 AF700
CD3  APC

串联染料没那么不稳定，只是PE对PE-cy7会有较大补偿，而CD25偏弱，如果能够有其它通道选择尽量安排其它通道

沃兹姬

niwanmao 发表于 2025-3-21 19:22
串联染料没那么不稳定，只是PE对PE-cy7会有较大补偿，而CD25偏弱，如果能够有其它通道选择尽量安排其它通 ...

好的，明白了。感谢倪老师指导！

xkx330

我都是Live+CD3+CD4+FoxP3+