CD25的FMO假阳

毛豆24821

做人源化小鼠的肿瘤检测，FMO中CD25-APC有一群阳性群，排除补偿和操作失误的原因，不知道为啥有这群，没有用488的荧光，也看不太出来是不是自发荧光。请教有没有方法解决

niwanmao

是CD25的FMO对照管吗？

其它通道分别是什么？是否有串联染料？

毛豆24821

niwanmao 发表于 2025-4-3 15:19
是CD25的FMO对照管吗？

其它通道分别是什么？是否有串联染料？

hurunhuan

把阳性群单独圈出来，看看在FSC/SSC图上的位置，是在主细胞群还是只是碎片。串联染料都有降解的可能性，APC-CY7有降解的概率，可以试试APC和APC-CY7都不染试试，如果消失，大概率是APC-CY7染料降解了。就只能优化操作或者是方案了。

niwanmao

毛豆24821 发表于 2025-4-3 16:30

如@hurunhuan  站友所说，目前暂时首先排查一下APC-cy7的染料降解可能性吧