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[其它临床检测] 用鼠抗人抗体查人T细胞内细胞因子之前需要先用鼠血清封闭

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发表于 2011-11-2 00:18:46 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
用鼠抗人抗体查人T细胞内细胞因子之前需要先用鼠血清封闭人淋巴细胞表面的FcR吗?实验室老师说不需要?我不太确定!请各位前辈指点!

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发表于 2011-11-2 06:51:31 | 显示全部楼层
以前很多抗体都是多克隆抗体,所以需要封闭,以减少非特异结合的背景。现在基本上都是单克隆抗体了,所以就不需要了。
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 楼主| 发表于 2011-11-2 20:33:12 | 显示全部楼层

请问倪老师有这方面的参考文献吗?
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发表于 2011-11-2 21:04:36 | 显示全部楼层
xyhongjin 发表于 2011-11-2 20:33
请问倪老师有这方面的参考文献吗?

这是基本原理,不需要参考文献。
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发表于 2011-11-3 13:36:45 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2011-11-2 06:51
以前很多抗体都是多克隆抗体,所以需要封闭,以减少非特异结合的背景。现在基本上都是单克隆抗体了,所以就 ...

但是现在的操作步骤还是有这一步骤啊,用BSA或者血清。我觉得无论如何,加上这一步骤,都不会有错,最多浪费点时间。
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发表于 2011-11-3 14:05:31 | 显示全部楼层
chujindong 发表于 2011-11-3 13:36
但是现在的操作步骤还是有这一步骤啊,用BSA或者血清。我觉得无论如何,加上这一步骤,都不会有错,最多 ...

主要是没有必要。即使要用,也得看情况,例如检测LAMBDA、KAPPA等轻链时,就得把血清彻底洗干净。
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发表于 2012-1-1 20:33:21 | 显示全部楼层
这个不是没有必要, 如果是检一些表达量比较高的细胞因子的话, 是可以不用封闭,  但如果是检测转录因子之类表达量很低的蛋白的话, 是非常非常的必要.....
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发表于 2012-1-2 08:59:37 | 显示全部楼层
rogasan 发表于 2012-1-1 20:33
这个不是没有必要, 如果是检一些表达量比较高的细胞因子的话, 是可以不用封闭,  但如果是检测转录因子之类 ...

原来如此啊,学习了!
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