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发表于 2025-5-2 17:01:39
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本帖最后由 sdl1991shi 于 2025-5-13 22:28 编辑
我一直有一个疑问,很多教程都说SSC和FSC通道中左下角靠近0位置的都是细胞碎片,但是我在流式圈门树突状细胞时,大多数的树突状细胞cDC1和cDC2都集中在左下角。
想请大家帮忙看看,其中,BV421是死活染料,APC是CD11c, APC-R700是MHCII,BV650是XCR1(cDC1),Percp-cy5.5是CD172a(cDC2)
问题:
1.想知道大多数DC细胞是不是都在左下角位置,因为大部分教程说左下角都是细胞碎片,细胞碎片也可以被荧光染料染色,最后被圈门吗
2.中间这一群是不是就代表着死细胞所在的位置
3.如果DC真的在SSC和FSC左下角位置,它为什么会这么靠下,和电压没什么关系,因为我在至少3个流式分析仪和分选仪上机,都是在最下方,而且电压不低
4.应该按单染管的界限圈门,还是按照FMO管的位置圈门
在BV650:cDC1亚群中CD80的圈门位置:按照图4的单染管圈在10*3次方的位置,按照CD80的FMO管圈在接近0次方的位置,为什么单染管和FMO管的圈门位置会差这么多。
在PerCPCY5.5:cDC2亚群中,单染管CD80的阴阳性群在10*3次左右的位置分群明显,但在全染管和FMO管中cDC2亚群几乎是阴性的的,没有阳性细胞,这是为什么。这些都来自于同一只小鼠的脾脏,是因为用的染料有4种都是BrilliantViolet 大分子染料的原因吗
请麻烦大神帮忙看一下CD80的设门位置应该在哪里,比较疑惑的地方在于CD86的表达量还可以,但是相对于的CD80几乎圈不出阳性细胞群,这是为什么
5.根据图11,不同圈门位置的cDC1亚群的位置会有变动,到底哪一个才是真实的cDC1细胞群体?
恳请各位大佬帮忙解答一下,非常非常感谢各位了,谢谢,谢谢
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