DOS诱导细胞的凋亡和周期实验，分组问题请教。

蓝lanlan

请各位老师帮忙看看，谢谢。
构建了可诱导表达X蛋白的肿瘤细胞系，慢病毒载体自带EGFP，想检测X对细胞恶性表型的作用。
凋亡和流式实验选择了赛默飞Annexin V-APC/PI试剂盒，想避开EGFP的干扰。
目前有5组细胞：U87，U87-vector,  U87-vector+DOS，U87-X，U87-X+DOS，请问该选那几组细胞？主要是搞不清用哪组来做补偿？（注：DOS诱导EGFP和目的蛋白的表达）

蓝lanlan

@niwanmao 麻烦版主看看，谢谢

niwanmao

实验组选择：
U87 - 作为阴性对照，不含任何外源表达
U87-vector+DOS - 载体对照组(诱导表达EGFP)
U87-X+DOS - 实验组(同时诱导表达X蛋白和EGFP)

按此实验组设置，对于补偿，可设置：
U87细胞 - 不加任何染料，用于了解空白位置，主要是确认电压是否合适，不建议用于设门。
U87细胞 + 仅PI染色 - 用于PI单染补偿
U87细胞 + 仅Annexin V-APC染色 - 用于APC单染补偿
U87-vector+DOS细胞不加染料 - 用于EGFP荧光补偿

蓝lanlan

niwanmao 发表于 2025-5-20 19:47
实验组选择：
U87 - 作为阴性对照，不含任何外源表达
U87-vector+DOS - 载体对照组(诱导表达EGFP)

谢谢版主，我好好学习一下

蓝lanlan

niwanmao 发表于 2025-5-20 19:47
实验组选择：
U87 - 作为阴性对照，不含任何外源表达
U87-vector+DOS - 载体对照组(诱导表达EGFP)

版主，想问一下，这个方案不需要考虑DOS诱导剂对细胞凋亡和周期的影响吗？

niwanmao

蓝lanlan 发表于 2025-5-21 10:30
版主，想问一下，这个方案不需要考虑DOS诱导剂对细胞凋亡和周期的影响吗？ ...

你这里主要目的是研究X蛋白表达对凋亡的影响吧？如果是，那么上面的分组设置我觉得是可以的