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[淋巴细胞亚群] 检测CD19CAR

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发表于 3 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
实验内容:分别用FITC-CD19重组蛋白、CD19-PE重组蛋白、CD19-APC重组蛋白检测同一CART细胞。
问题1、有什么相对的耗材可以把三个不同通道的荧光强度归一化,具有可比性。可以排除因为本身FITC/PE/APC荧光不同导致的MFI差别很大。

问题2、灵敏度上如何区分,情况举例如FITC70%,CD19-PE90%,CD19-APC92%。该选择哪个进行后续检验。推测FITC本身荧光较弱灵敏度不够,导致检测较低,该数据是否还有可参考价值。有哪些类似的研究,依据什么标准筛选这三个重组蛋白。

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发表于 前天 15:21 | 显示全部楼层
用对应荧光的荧光定量微球,分别对不同荧光素标记抗体进行分子数定量,这个最客观


也可以混入相同的明确CAR阴性细胞,以其为阴性本底,对比CAR细胞的MFI与此阴性细胞的MFI比值
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