如何选择不同克隆的抗体？

xyhongjin

同样的抗体可以来源于不同的克隆，这在购买配套的其他试剂时（比如同型对照）需要注意些什么？比如eB的CD4抗体有RPA-T4的和OKT4，不同克隆的抗体在哪些方面有差异？多谢指教！

niwanmao

不同克隆的抗体，其针对的结合位点不同，因此检测出来的结果也可能会有所不同，至于哪个克隆更适合，我建议你结合参考文献选择使用最多的克隆。如果没有参考文献，需要查看说明书，或者只能摸索。

xyhongjin

niwanmao 发表于 2011-11-3 22:16

                               
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不同克隆的抗体，其针对的结合位点不同，因此检测出来的结果也可能会有所不同，至于哪个克隆更适合，我建议 ...

谢谢倪老师！那么如果我选择Anti-Human IL-4 PE（同型是IgG1 Kappa），他的同型是就因该选择Mouse IgG1 K Isotype Control PE，对吗？

niwanmao

xyhongjin 发表于 2011-11-3 22:34

                               
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谢谢倪老师！那么如果我选择Anti-Human IL-4 PE（同型是IgG1 Kappa），他的同型是就因该选择Mouse IgG1 K ...

是的。最好选择同一家公司的。

chujindong

这个问题我也问过，BD和BIOLEGEND的技术支持都说相差不大。看你是什么研究目的了，如果是专门研究这些抗体不同位置的那肯定是要参考一下的，如果是普通的检测，比如只关注其数量、比例，应该就不用考虑这些。而且我记得这些同一种抗体不同克隆之间价格是没有差异的。看文献的话一般也很难看到有特别标记流式抗体的克隆号的，连货号都很少写。我认为可以任意挑一种。

niwanmao

chujindong 发表于 2011-11-8 13:07

                               
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这个问题我也问过，BD和BIOLEGEND的技术支持都说相差不大。看你是什么研究目的了，如果是专门研究这些抗体 ...

文献中要写克隆号的，这对于能否重复实验结果很重要。10月28－29日的深圳会议上讨论免疫分型标准操作规程时就提到大家尽可能用某个克隆号，就是因为某个克隆针对标记的特定位点，重复起来结果才会统一。

haven_t

国内文献基本没写克隆号，国外也有部分没写。
上个月做流式发现一个问题，当时用BD六色TBNK进行检测，发现粒细胞什么都没表达（不是一两个标本，而是整个月近百个标本），记得以前用双色CD16+56/CD3 时粒细胞CD16会很强的，我猜测是克隆号的问题，或者抗体里只有CD56没有CD16。

xyhongjin

niwanmao 发表于 2011-11-4 08:49

                               
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是的。最好选择同一家公司的。

倪老师您好！我如果使用ebioscience的BMS107FI抗体标记Th1（http://www.ebioscience.com/human ... fitc-gz-4-17903.htm），那么同型应该选那个呢？

xyhongjin

还用有anti-human CD4 PerCP Cy5.5标记CD4需要用PerCP Cy5.5的同型对照吗？

niwanmao

haven_t 发表于 2011-11-8 15:08

                               
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国内文献基本没写克隆号，国外也有部分没写。
上个月做流式发现一个问题，当时用BD六色TBNK进行检测，发现 ...

TBNK KIT这个问题似乎我在哪里也听人提起过，原因不详。估计是克隆的问题。