淋巴细胞分离法与裂红法获取PBMCs各有何优缺点？

xyhongjin · 发表于 2011-11-8 20:20:09

请问淋巴细胞分离法与裂红法获取PBMCs各有何优缺点？

niwanmao · 发表于 2011-11-8 20:20:10

xyhongjin 发表于 2011-11-8 20:29

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如果以CD4设门，测IFN-gamma和IL-4的比例以反映Th1/Th2，选用分离法和裂解法法对结果会有影响吗？ ...

niwanmao · 发表于 2011-11-8 20:24:17

Ficoll分离法才是获取PBMC的方法。红细胞裂解是获取所有非红系细胞的方法，不是获取PBMC的方法。

xyhongjin · 发表于 2011-11-8 20:29:45

niwanmao 发表于 2011-11-8 20:24

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Ficoll分离法才是获取PBMC的方法。红细胞裂解是获取所有非红系细胞的方法，不是获取PBMC的方法。 ...

如果以CD4设门，测IFN-gamma和IL-4的比例以反映Th1/Th2，选用分离法和裂解法法对结果会有影响吗？

hx0628 · 发表于 2011-11-8 23:01:10

应该不会有影响。

xyhongjin · 发表于 2011-11-9 12:16:09

niwanmao 发表于 2011-11-9 08:28

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多多少少会有点影响：http://www.flowcyto.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=473

谢谢倪老师！

chujindong · 发表于 2011-11-15 23:31:11

CD4会被PMA下调，导致CD4分群不清，做的时候要注意摸好条件。可以的话最好用CD3+CD8-反设CD4+细胞。

liujiabdyy · 发表于 2011-12-10 19:00:55

估计用血标本做差不多，但我最近用前列腺组织做，感觉FICOLL的方法也不是很完美啊！因为组织里的细胞成分太复杂了！看来要定制FICOLL液了，唉！在中国做实验，真苦B！

niwanmao · 发表于 2011-12-10 21:01:11

liujiabdyy 发表于 2011-12-10 19:00

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估计用血标本做差不多，但我最近用前列腺组织做，感觉FICOLL的方法也不是很完美啊！因为组织里的细胞成分太 ...

前列腺组织为什么用FICOLL提？难道组织细胞是单个核细胞？

chujindong · 发表于 2011-12-12 12:05:02

niwanmao 发表于 2011-12-10 21:01

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前列腺组织为什么用FICOLL提？难道组织细胞是单个核细胞？

liujiabdyy可能是要提取前列腺组织中的单个核细胞，但是用的FICOLL跟提取血中的PBMC是不一样的，需要自己配某一比例的分离液，比较麻烦。

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