肺组织细胞分离

瓜瓜999

我有两组老鼠，手术组是心衰模型，肺组织重量在300-500mg之间。另外就是sham组的肺在120-170mg。

如果用所有的肺组织，那手术组的肺，消化酶的用量是要增加吗？还是保持消化酶总体积一定，但是浓度增加？

求问如何设计cell isolation protocol呢？谢谢~

niwanmao

该版块是用于分享好用、成熟的Protocol。不是提问用的，本次先帮你转移，请下次发到提问版块，谢谢。

我不做这方面，但尝试从原理上回复一下，欢迎有相关经验的站友参与讨论。

1、酶用量： 做组织消化的目标，是要提供足够的酶活性，把包在细胞外面的细胞外基质完全分解掉。通过增加酶溶液的总容量，但保持它的浓度不变，消化效果也就比较一致。如果增加酶的浓度而不增加体积，就有把组织消化的过头的风险。酶浓度太高，可能会损伤细胞表面的标记物，影响细胞的存活率。
2、具体的Protocol，可参考一下站内之前发的小鼠原位肺肿瘤模型的建立及通过流式细胞术评估对侧肺转移的方法（https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-11811-1-1.html）