Annexin V-PE和7-AAD双染凋亡数据分析，求帮忙

PompyJohn

本人用Annexin V-PE和7-AAD双染，检测凋亡的结果，因为我这里的机器上的软件输出的PDF数据分辨率很低不能用，只能自己用FCS Express4软件打开。我在机器上明明已经调好了补偿，可是回来用软件打开后跟在机器上显示的不一样，请问还要用软件调补偿吗？具体参照什么调呢？现在将两种数据图片传到附件，请知道的老师帮帮忙，谢谢了

niwanmao

应该选择FL-1和FL-2这两个通道分析吧？

PompyJohn

niwanmao 发表于 2011-12-19 09:09

                               
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应该选择FL-1和FL-2这两个通道分析吧？

倪老师，Annexin V-PE的发射波长是578，应该是FL2检测，7-AAD发射波长是647，荧光用FL3检测，不知您说的用FL1检测哪个？

niwanmao

PompyJohn 发表于 2011-12-19 09:15

                               
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倪老师，Annexin V-PE的发射波长是578，应该是FL2检测，7-AAD发射波长是647，荧光用FL3检测，不知您说的 ...

嗯，sorry，搞错了。你要么把原始数据传上来，我们一起看看。

PompyJohn

现在已经把原始数据上传到附件了，请指点

PompyJohn

niwanmao 发表于 2011-12-19 09:18

                               
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嗯，sorry，搞错了。你要么把原始数据传上来，我们一起看看。

倪老师，我已经上传了原始数据，请您看看

niwanmao

PompyJohn 发表于 2011-12-19 09:22

                               
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倪老师，我已经上传了原始数据，请您看看

你做的是什么细胞？为什么用FSC-SSC的Log变化来取，难道比红细胞和血小板还小？如果不是，那么说明你取到的都是非特异信号或碎片，正常的细胞反而你没收集到。

PompyJohn

niwanmao 发表于 2011-12-19 10:24

                               
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你做的是什么细胞？为什么用FSC-SSC的Log变化来取，难道比红细胞和血小板还小？如果不是，那么说明你取到 ...

我做的是PK15细胞，用FSC-SSC线性图，细胞都挤在图的左下角，不能调到图的中央，没办法，只能取log，我取的激发参数是FSC0.3871v

PompyJohn

niwanmao 发表于 2011-12-19 10:24

                               
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你做的是什么细胞？为什么用FSC-SSC的Log变化来取，难道比红细胞和血小板还小？如果不是，那么说明你取到 ...

我还想问一下倪老师，在FSC-SSC图中，最先从左下角出来的应该是细胞还是非特异信号或碎片？

haven_t

FCS express无法识别数据文件中的补偿矩阵，所以要手动设置。记下机器补偿，然后在fcs express上调节吧