能否分享荧光素标记p-STAT6抗体的protocol?

wzr19990923

需要FCM检测小鼠巨噬细胞的pSTAT6水平，看国外的参考文献仅仅提及整个protocol过程中需要在磷酸化酶和蛋白酶抑制剂的存在下进行。买的cell signaling公司的磷酸化酶和蛋白酶抑制剂也没用具体说明，BD Phosflow公司的pY641说明书上需要加刺激剂，也没用很详细的步骤。而我的实验不需要刺激细胞，直接检测细胞内的磷酸化水平，不知道是否有人做过类似的实验？磷酸化酶和蛋白酶抑制剂cocktail需要加多少量？其他步骤是否和平常的固定、破膜一样？谢谢指教！

niwanmao

没做过，但帮你找到一篇cytometry A 2003年的文章， 看看是否对你有帮助？

见附件：
intracellular phospho-staining.pdf (574.93 KB, 下载次数: 33)

2012-1-18 21:28 上传

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磷酸化蛋白染色
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wzr19990923

niwanmao 发表于 2012-1-18 21:29

                               
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没做过，但帮你找到一篇cytometry A 2003年的文章， 看看是否对你有帮助？

见附件：

谢谢帮助。