Breg有人做过吗

chujindong

有同学要做Breg的检测。这东西比较新鲜，完全没有听说过。它的表面标志物是CD19 CD5 CD1d（high）。Treg有时候用CD4CD25CD127(high)。我没有做过这个，不知道这个high是怎么规定的？请大家指教一下，谢谢！

niwanmao

我们这边课题组用的是CD19 CD24 CD27检测Breg。
high的意思就是高表达，属于荧光表达强度上的概念，参见: http://www.flowcyto.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=820

chujindong

niwanmao 发表于 2012-2-8 21:15

                               
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我们这边课题组用的是CD19 CD24 CD27检测Breg。
high的意思就是高表达，属于荧光表达强度上的概念，参见: h ...

怎么觉得这么复杂呢。high的标准还是比较难掌握啊。如果按CD19 CD24 CD27做的话似乎就要简单多了。

niwanmao

chujindong 发表于 2012-2-8 21:29

                               
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怎么觉得这么复杂呢。high的标准还是比较难掌握啊。如果按CD19 CD24 CD27做的话似乎就要简单多了。 ...

其实说到底，这种low、med、high也是一种模糊的划分，可以根据自己的工作经验来测算其荧光表达强度应该属于哪个等级。

chujindong

niwanmao 发表于 2012-2-9 08:57

                               
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其实说到底，这种low、med、high也是一种模糊的划分，可以根据自己的工作经验来测算其荧光表达强度应该属 ...

今天做的Breg，标记CD19CD5CD1d（high），上了机完全没有头绪。
[attachimg]911
PE标记CD1d,FITC标记CD5。做的是人全血，裂红。
到底怎么样区分高低限？看还需要什么图？

niwanmao

chujindong 发表于 2012-2-25 17:00

                               
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今天做的Breg，标记CD19CD5CD1d（high），上了机完全没有头绪。
[attachimg]911
PE标记CD1d,FITC标记CD5 ...

平时有没有做过正常淋巴细胞的CD1d？可以参考那些细胞的水平。

chujindong

niwanmao 发表于 2012-2-25 17:15

                               
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平时有没有做过正常淋巴细胞的CD1d？需要参考那些细胞的水平，正常淋巴细胞应该是高表达的。 ...

没有做过正常人的。这个据说是胰腺炎病人的血。

chujindong

这个是BIOLEGEND公司小鼠Breg流式试剂盒说明书上的图，做的是小鼠脾细胞

niwanmao

chujindong 发表于 2012-2-25 17:32

                               
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这个是BIOLEGEND公司小鼠Breg流式试剂盒说明书上的图，做的是小鼠脾细胞

不好意思，刚才出去了一趟。
看他们说明书上所示，看来正常t细胞可能是中等表达，那我觉得你可以把门设在这大堆的细胞上缘。

ruthyhx

这个图中哪群是Breg细胞？人外周血CD19APC/CD5FITC/CD1DPE，谢谢！