同型对照和阳性组区分不开

accord220cs · 发表于 2012-3-1 17:07:35

大家好，目前检测一个高表达CD123的细胞株，抗体是FITC-CD123,来源是Mouse IgG1,k，同型对照FITC-Mouse IgG1,k，但上机后发现同型对照和阳性抗体几乎在同样的位置，下图就是我用overlay之后的效果，绿色的是同型对照，紫色的是FITC-CD123,另外，FSC-SSC图看起来细胞还分了两团，按理说细胞系的细胞应该比较集中才对，请问，是不是同型对照没选好，细胞状况有没有问题。
谢谢。

niwanmao · 发表于 2012-3-1 20:45:36

建议不要圈中左边那群，因为这像是状态差的细胞，不适合分析。

ddn111 · 发表于 2012-3-1 22:18:08

细胞状态是一个问题，分两群也有可能是粘连细胞造成的！但不管哪种原因，实验组还是和同型没差异，呵！但也不排除两个都是阳性？如果肯定是高表达株的话，上个空白细胞吧。说不定同型对照有问题呢！

accord220cs · 发表于 2012-3-2 09:26:49

好的，谢谢两位。当时同时检测了空白细胞没问题，在同样条件下，空白细胞是在10的1次方以内，我忘了贴图了。因这细胞是别人养的，我再去问问具体情况。

ddn111 · 发表于 2012-3-2 09:58:13

空白细胞没问题，那意味着非特异结合，麻烦了！呵！

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[细胞因子检测] 同型对照和阳性组区分不开