MFI 与百分率

dugo · 发表于 2012-3-11 21:24:28

流式细胞几乎一无所知！

向各位请教！望不吝赐教！

前段时间流式老师给的结果，现在有老师提问：按照你的流式细胞图（百分率图），MFI应该在100以上，怎么会在50呢，剩下的阴性部分的细胞是什么呢？我总觉得百分率和MFI没有关系的，我也看过文献MFI的值只是个位数，但是按照百分率应该是挺高的。我不是很懂，希望各位帮忙解答一下！

十分感谢！

niwanmao · 发表于 2012-3-11 21:32:29

你这个图属于两个图叠加之后的效果。
白色部分是阴性对照或空白对照；黑色部分是标本。
你的百分率是指黑色部分的表达百分率，不能反映MFI高低。
MFI是指平均荧光强度，黑色部分的MFI刚才没仔细看，现在看看在10E1－10E2之间，50左右应该是对的。

dugo · 发表于 2012-3-11 21:39:50

十分感谢版主的解答，但是他问我阴性部分是什么，我总觉得百分率阴性部分好回答，就是不表达的，那么MFI阴性部分是什么呢，谢谢！

gcz5340 · 发表于 2012-3-11 22:18:55

MFI是平均荧光强度你应该知道，每个细胞经过流式细胞仪检测都会有一个相对强度的荧光值。阴性细胞没有特异性荧光，也会发生很微弱的自发荧光，因此有很小的荧光强度；阳性细胞的特异性荧光强度是阴性细胞荧光强度的几百甚至几千倍。MFI就是把所以细胞的荧光强度相加再除以细胞数，就是所有细胞荧光强度的一个平均值。一般来说，百分比越高那肯定MFI就高，百分比低相应MFI就低，有时候两个样本百分比相处不多看不出差别时，MFI就能很好的反应这种微弱的差异。

dugo · 发表于 2012-3-11 22:30:21

谢谢回答，那百分率就是在你设门后认为是阳性的细胞的比例吧？再有荧光强度是不是和你用的抗体所标记的荧光（质量？）有很大的关系吧？

niwanmao · 发表于 2012-3-12 08:41:56

dugo 发表于 2012-3-11 21:39

登录/注册后可看大图

十分感谢版主的解答，但是他问我阴性部分是什么，我总觉得百分率阴性部分好回答，就是不表达的，那么MFI阴 ...

概念错了，没有MFI阴性这个概念啊。只能说，你统计的是哪群细胞的MFI。例如你光统计MARKER内的细胞MFI，那么可能是有50左右。如果统计的是黑色整群细胞的MFI，那么可能只有20多。因为MARKER内的细胞把低荧光强度的那堆排除掉了。

niwanmao · 发表于 2012-3-12 08:44:47

dugo 发表于 2012-3-11 22:30

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谢谢回答，那百分率就是在你设门后认为是阳性的细胞的比例吧？再有荧光强度是不是和你用的抗体所标记的荧光 ...

荧光强度和标记、电压都有关。
你就跟那位老师这样解释：我统计的MFI（平均荧光强度）是门内细胞的平均荧光强度，是个平均值，不是一个阳性、阴性分界值。

dugo · 发表于 2012-3-12 18:03:45

谢谢斑竹

ddn111 · 发表于 2012-3-13 22:11:57

看楼主的图，MARKER线应该还要左移，画到交界的位置！阳性率应该还要高！

菜鸟 · 发表于 2017-6-28 15:53:11

每一个细胞的荧光强度体现在流式结果的什么地方

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