PI染色疑难问题

飞向蓝天

     各位老师，PI染液可以识别仅有4%的DNA含量差别的两类细胞吗?能不能分别检测到和PI的浓度相关吗？

niwanmao

4％的差异估计有点困难。
这里有篇描述dna染色的资料，里面提到：With satisfactory CV values, separate peaks can be distinguished for DNA index values of < 0.95 and > 1.05。就是说CV值小的情况下，可以区分出差异大于5％的峰。

http://www.fmshk.com.hk/hkabth/em/200205.htm

飞向蓝天

但是， PI与DNA结合，结合量与DNA含量成正比，理论上4％的差异就可以检测到的呀。难道与488的激光有关

niwanmao

飞向蓝天 发表于 2012-4-11 11:45

                               
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但是， PI与DNA结合，结合量与DNA含量成正比，理论上4％的差异就可以检测到的呀。难道与488的激光有关 ...

是和DNA含量成正比，但是由于CV的存在，使得4％的差异无法体现出来。类似于一对双胞胎，如果长的很像，由于差异很小，我们很难鉴别出来，如果长的不一样的地方多一点，那么就能区分了。

haven_t

4%基本上就是46XX和46XY的差异，你试一下用男性和女性的单个核细胞混在一起染一下，如果可以以后就不用做FISH了。
不过即使2um的 beads 上机时的CV有2~3%，也就是有2~3%的变异，何况是细胞。