流式抗体也可以用于磁珠分选

gcz5340 · 发表于 2012-5-6 19:17:21

本帖最后由 gcz5340 于 2012-5-6 19:36 编辑

整理冰箱时发现以前老师留下的一瓶Miltenyi的anti-PE microbeads，刚开始还不知道是什么东西，搜索了一下，其实就是针对PE荧光素的一种抗体，而且带小球的。这样流式抗体（如带PE荧光素的）标记细胞，再加上这种带小球的anti-PE antibody，然后过磁铁就可以进行磁珠分选了，而且既可以正选也可以负选。以前没听说这种产品，不知道论坛里有没有人用过的来谈谈经验。

olivezhou0716 · 发表于 2012-5-6 19:17:22

谢谢倪老师。不好意思最近比较忙没有及时回复郭老师的问题。anti-PE microbeads是一种二抗标记的微珠，可以通过与PE耦联的抗体结合（相当于二抗与一抗的结合）挂在目的细胞上，从而将目的细胞分选出来，这种间接标记的分选在没有合适的直接标记磁珠是特别有用，比如有些老师研究材料的物种比较稀有如猪，或者细胞类型比较稀有，只要是能找到合适的抗体（可以有荧光耦联如FITC/PE/APC/BIOTIN，也可以是纯抗体），就能把细胞甚至其它组分如mRNA/蛋白/亚细胞器/病毒/细菌等分离或纯化出来。
欢迎大家针对磁珠分选踊跃提问！

niwanmao · 发表于 2012-5-6 19:36:51

上次我似乎看到一个美天旎的技术支持注册了，明天联系联系看，让她来回答你的问题

CRP · 发表于 2012-5-6 23:48:26

有这种产品吗？可是分选流式抗体有何意义呢？只是一种理论上的可行

估计是一种间接进行细胞分选的方式，有些可能不适合或者没有直接标记的磁珠

niwanmao · 发表于 2012-5-7 11:23:20

帮你问过了。只要你这个microbeads没有失效，是没有问题的，可以做的，这属于间接分选。

CRP · 发表于 2012-5-8 21:04:19

本帖最后由 CRP 于 2012-5-8 21:05 编辑

olivezhou0716 发表于 2012-5-8 10:41

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谢谢倪老师。不好意思最近比较忙没有及时回复郭老师的问题。anti-PE microbeads是一种二抗标记的微珠，可以 ...

您是哪个公司的？上海那个代理还是?

niwanmao · 发表于 2012-5-9 17:41:18

CRP 发表于 2012-5-8 21:04

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您是哪个公司的？上海那个代理还是?

olivezhou0716是美天旎公司的技术支持。是原版的。

samly0 · 发表于 2012-5-12 18:59:12

我读研的时候用过一个过期2年多的磁珠分选试剂盒，是德国Miltenyibiotec公司的，做调节性T细胞的磁珠分选，用的是小鼠脾脏和淋巴结还有胸腺来源的组织细胞制成的单个核细胞悬液，分选效果还不错，纯度也能到90%以上，我后来也做过磁珠分选CD4+T细胞的，纯度98%以上，分选出来的细胞拿来刺激培养，我当时是没有可以做分选的流式机子，所以选择这种磁珠分选的方法，如果有条件的话还是选择用流式分选方便点吧

niwanmao · 发表于 2012-5-12 19:02:07

samly0 发表于 2012-5-12 18:59

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我读研的时候用过一个过期2年多的磁珠分选试剂盒，是德国Miltenyibiotec公司的，做调节性T细胞的磁珠分选， ...

做调节性t的磁珠分选？那应该有好几个标记，一起用？还是逐个分选？

samly0 · 发表于 2012-5-12 21:09:30

先阴选CD4+T细胞，再阳选CD25-PE标记的细胞，得到的CD4+CD25+标记的细胞，这群细胞绝大部分也是Foxp3阳性的，需要protocol么？

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[流式分选] 流式抗体也可以用于磁珠分选

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