不同颜色标记的anti-CD4的差别？

FacsAriaIII · 发表于 2012-6-16 17:35:44

图有点不清楚，见谅。这两个孔染的是同一种细胞，CD8是用一样的抗体，只是CD4用的不同，一个是FITC，一个是PE标的，基本上，细胞分群是一样的，只是，我不明白，右边那个图，为什么CD8单阳性的那个区间显示的是65.多%，但是图上的细胞看起来却没那么多呢？，不像左边图里的多。难道因为电压或者补偿的问题？很多细胞都跑到框框外面了？
谢谢，请不吝赐教。

haven_t · 发表于 2012-6-16 17:35:45

本帖最后由 haven_t 于 2012-6-18 15:15 编辑

FacsAriaIII 发表于 2012-6-18 14:50

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用等高图的确能看到许多细胞在坐标轴上。我很想知道这是什么原因造成的，怎么纠正啊。印象上，只有左边那种 ...

PE-PECy7 的补偿值太大了，PECy7的检测误差会随补偿运算进入PE通道，造成PECy7阳性群体PE通道数据离散程度加大，向下离散的数据无法显示在对数坐标上，只能在坐标轴上堆叠。解决方法上面已经说过，数字补偿代替电路补偿，然后用双指数坐标来显示。

niwanmao · 发表于 2012-6-16 23:10:20

有没有跑到坐标轴下面？

niwanmao · 发表于 2012-6-17 12:07:40

既然有统计数据，还是应该以统计数据为准，我估计要么跑到坐标轴下面去了，要么就是图形显示出问题。

haven_t · 发表于 2012-6-17 20:30:15

补偿过了，用等高图看就会看到坐标轴上堆了很多细胞。最好的办法是进行数字补偿，然后用双指数坐标来显示。

niwanmao · 发表于 2012-6-18 09:08:47

haven_t 发表于 2012-6-17 20:30

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补偿过了，用等高图看就会看到坐标轴上堆了很多细胞。最好的办法是进行数字补偿，然后用双指数坐标来显示。 ...

嗯，等高图确实是一个办法。不过FacsAriaIII的这个图我感觉挺奇怪的，PE和PE-CY7双阳性那堆细胞的补偿挺好的，只是比PE单阳性略低一点，怎么偏偏PE-CY7单阳性那堆会跑底下去了。看来补偿对PE-CY7单阳性的细胞更敏感？

FacsAriaIII · 发表于 2012-6-18 14:50:55

用等高图的确能看到许多细胞在坐标轴上。我很想知道这是什么原因造成的，怎么纠正啊。印象上，只有左边那种图看起来要舒服些。

FacsAriaIII · 发表于 2012-6-18 21:08:01

什么是数字补偿啊？电路补偿是不是在记录数据之前做的那些补偿？就是在FACS机器上做的那些？

niwanmao · 发表于 2012-6-18 21:15:33

FacsAriaIII 发表于 2012-6-18 21:08

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什么是数字补偿啊？电路补偿是不是在记录数据之前做的那些补偿？就是在FACS机器上做的那些？ ...

我觉得haven_t讲的应该就是事后补偿，就是利用软件分析时进行的补偿调节。

FacsAriaIII · 发表于 2012-6-20 08:01:34

哦。这样的啊。谢谢二位老师啦！！

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[试剂耗材] 不同颜色标记的anti-CD4的差别？

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