外周血NK细胞检测

niwanmao

荧光标记CD3－CD16＋CD56＋检测外周血NK细胞

外周血NK细胞的检测

kobe327292007

楼主，可以不可以用FITC标记的CD3和PE分别标记的CD56、CD16一起测啊？这样不管是CD16阳性还是CD56阳性，都是计算在NK细胞数里。

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-5-1 18:42

                               
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楼主，可以不可以用FITC标记的CD3和PE分别标记的CD56、CD16一起测啊？这样不管是CD16阳性还是CD56阳性，都 ...

这个图是《实用流式细胞术图谱》中摘录的，就是按照FITC标记的CD3和PE分别标记的CD56、CD16一起测的。可能图示第一行它的标示有点不正确。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-5-1 18:51

                               
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这个图是《实用流式细胞术图谱》中摘录的，就是按照FITC标记的CD3和PE分别标记的CD56、CD16一起测的。可 ...

嗯，刚刚查了些资料，发现现在都有Anti-human CD3 FITC/(CD16+CD56) PE Cocktail了，但是后面没有图，不像其它的CD3都有附图。

kobe327292007

附上一张我做过的图，细胞量偏小，不能用，发来算是回馈下论坛吧。
我想问个小问题，见笑了啊，加完抗体室温孵育30分钟后，用PBS怎么个洗法啊？
是先离心，去掉抗体，然后再加500ul PBS洗两遍，还是直接加PBS洗两遍啊？加PBS洗的话，加多少ul？
当然我这里也有protocal，就是想知道大神们都是怎么做的。

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-5-1 19:05

                               
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附上一张我做过的图，细胞量偏小，不能用，发来算是回馈下论坛吧。
我想问个小问题，见笑了啊，加完抗体室 ...

这里没有大神，都是爱好流式细胞术的朋友

洗涤的时候加多少PBS没要求，一般洗1－2次均可。你这个细胞数量少，但分群还可以啊。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-5-1 19:10

                               
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这里没有大神，都是爱好流式细胞术的朋友

洗涤的时候加多少PBS没要求，一般洗1－2次均可。你 ...

是的，当时检测的老师说这个细胞分群挺好看的，细胞要是量足的话就更好了。

dragonhzqsmmu

请教一下老师，是否把CD16和CD56用两种不同的荧光素标记，这样除了总的NK的比例，还能分析NK的亚群？如果是用不同的荧光素标记的话，CD16和CD56一般选用什么荧光素，CD16用PE，CD56用APC？我们这边是Calibur的的机器，不知道这样可不可以？多谢。

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-13 11:18

                               
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请教一下老师，是否把CD16和CD56用两种不同的荧光素标记，这样除了总的NK的比例，还能分析NK的亚群？如果是 ...

可以的

stillup

niwanmao 发表于 2013-6-13 14:49
可以的

倪老师，我看有的文献NK细胞只标记cd3-和cd56+ 这样也可以吗 有些文章分数还挺高