分选脾脏调节性T细胞

shaniu · 发表于 2012-10-29 21:48:33

本帖最后由 shaniu 于 2012-10-30 09:04 编辑

各位高人

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，帮忙分析一下，我用流式细胞分选仪分选脾脏调节性T细胞时，淋巴细胞分群不明显，而且Treg比例太低是怎么回事，有图如下

CD127PE CD25 PE-Cy7

niwanmao · 发表于 2012-10-29 21:53:37

各个荧光通道分别是什么标记？是CD4 FITC、CD25 PE-CY7、CD127 PE吗？Treg本身就比例很低的啊

shaniu · 发表于 2012-10-29 21:56:45

感觉没有明显的分群啊。而且比例只占CD4的1.6%

shaniu · 发表于 2012-10-29 21:59:39

niwanmao 发表于 2012-10-29 21:53

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各个荧光通道分别是什么标记？是CD4 FITC、CD25 PE-CY7、CD127 PE吗？Treg本身就比例很低的啊 ...

主要是分群不明显啊，而且比例只有CD4+的1.6%

gcz5340 · 发表于 2012-10-29 22:21:36

shaniu 发表于 2012-10-29 21:59

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主要是分群不明显啊，而且比例只有CD4+的1.6%

1、FSC/SSC图里面好像杂质还是碎片太多，样本制备没什么问题吧；

2、你这P6看群体分我觉得是CD25-，不可能CD25全阳吧，对照做了吗，把所有原始结果拷过来看看。

shaniu · 发表于 2012-10-30 09:09:03

gcz5340 发表于 2012-10-29 22:21

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1、FSC/SSC图里面好像杂质还是碎片太多，样本制备没什么问题吧；

2、你这P6看群体分我觉得是CD25-，不可 ...

老师，不好意思，上面注解错了。PE-A： CD127 PE-Cy7：CD25
1.您看看这个等高线图，淋巴细胞设门设的对吗？
2.注解错了，不好意思。您看看这样还有问题吗

olivezhou0716 · 发表于 2013-5-7 11:29:12

shaniu 发表于 2012-10-30 09:09

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老师，不好意思，上面注解错了。PE-A： CD127 PE-Cy7：CD25
1.您看看这个等高线图，淋巴细胞设门设的对 ...

Treg如果看CD25和CD127本身分群就不会很明显，Treg占脾脏细胞比例差不多在1%左右，随着年龄和免疫状态变化也有些改变。如果流式效果不好，可以试试美天旎的磁珠分选：CD4+CD25+ Regulatory T Cell Isolation Kit, mouse
130-091-041 ，在半价促销

shaniu · 发表于 2013-5-7 21:49:49

olivezhou0716 发表于 2013-5-7 11:29

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Treg如果看CD25和CD127本身分群就不会很明显，Treg占脾脏细胞比例差不多在1%左右，随着年龄和免疫状态变 ...

用磁珠分选的成本大约是流式分选的几倍啊，我们这边没有人做过，还有，分选出细胞的活性是不是更好啊

olivezhou0716 · 发表于 2013-5-21 12:55:05

活性更好，成本肯定与效果成正比啊。不过现在磁珠都有特价，也降了不少

niwanmao · 发表于 2013-5-21 13:12:46

olivezhou0716 发表于 2013-5-21 12:55

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活性更好，成本肯定与效果成正比啊。不过现在磁珠都有特价，也降了不少

我看美天旎二季度的促销力度还挺大的嘛。 @shaniu

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