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[淋巴细胞相关] 请教经验补偿值问题

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发表于 2012-11-5 16:52:32 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
本帖最后由 sunnyhill 于 2012-11-5 16:54 编辑

我买了ebioscience公司的几个抗体,pe cy5//apc efluor 780//alexa fluor 700
测人淋巴细胞的几个表型,机器是BD的FCScantonII,激发波长为633,单管调补偿时发现其中某些抗体表达不理想,请教各位大侠,我应该怎样调补偿好呢?谢谢!(有谁调过这三个颜色的补偿,请直接提供经验值)

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发表于 2012-11-5 22:20:34 | 显示全部楼层
你这三个抗体在细胞中的表达如何,是否每种标记都有阳性对照?
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 楼主| 发表于 2012-11-10 18:05:04 | 显示全部楼层

三个抗体中只有一个有明确的表达,其余两个都不确定,三个一起染的时候似乎有表达,但是我做单染的时候,“700”和“780”两个似乎表达比较差
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发表于 2012-11-10 22:42:20 来自手机 | 显示全部楼层
sunnyhill 发表于 2012-11-10 18:05:04

三个抗体中只有一个有明确的表达,其余两个都不确定,三个一起染的时候似乎有表达,但是我做单染的时候,“700”和“780”两个似乎表达比较差

参见: http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1417-1-1.html
首先可以明确的是pe-cy5与其他两种染料没有补偿。其次,apc eflour780跟apc-cy7的荧光谱是一样的。所以,你只要调节780和700之间的补偿就可以了
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 楼主| 发表于 2012-11-15 15:57:52 来自手机 | 显示全部楼层
好的,非常感谢!!
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