求助RNase怎么配置的

jojo198892

我用流式细胞仪做PI单染法测Hela细胞周期，效果一直不太好，看到有人说RNase酶要灭活15分钟，我用的那个小瓶子上面写了BIO BASIC INC，货号RB0473-25MG，这个应该哟灭活吧？

我配置是用PBS配的，看到有人说要加Tris——100和Nacl溶液的，这个没看懂。。用PBS应该也没事吧？
还有离心大家都用多大啊？做流式细胞仪的老师让我清洗用1000转每分钟的，离心乙醇用2000转的。。是不是高了？老师说离心乙醇要用大点的转速。。。

求高手解惑！！！！

niwanmao

其实你问的应该是PI染液的配制，请参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1330-1-1.html

关于离心速度多大，一般来说我们平时用1500转/分，象你这里提到的这几个速度，我觉得问题都不是很大。

jojo198892

谢谢回复，你给我那个帖子我看过的，用的是DNase-free RNase  ，这个是不用灭活的，我那个RNase标签上面没有写。。所以我估计要灭活。15分钟沸水浴应该不会破坏RNase活性吧，我看到有人沸水浴了说会产生沉淀。。。   
请问DNA 染色液（10ml，新鲜配制）能保存吗？ 可以一下配几份冻存用的时候再37度水浴吗？

niwanmao

jojo198892 发表于 2012-11-8 13:52:59

                               
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本帖最后由 jojo198892 于 2012-11-8 13:58 编辑

谢谢回复，你给我那个帖子我看过的，用的是DNase-free RNase  ，这个是不用灭活的，我那个RNase标签上

你没有仔细看，那个帖子中已经把你现在的疑问都讲了，请再仔细看看