流式没有堵塞但是只能用清洗程序，其他程序均不能用

zml

各位前辈好，我刚接触流式细胞仪不久。我们实验室所用的仪器是Beckman-XL-MCL,但是这次使用的时候出现了，只能跑清洗程序，其他程序均没有检测信号。用cleaning panel 跑荧光微球可以检测到信号，但是其他的protocal就不可以。不知道给我是否有遇到类似情况，还请大家指教，谢谢了

niwanmao

zml 发表于 2012-12-6 22:23:49

                               
登录/注册后可看大图

各位前辈好，我刚接触流式细胞仪不久。我们实验室所用的仪器是Beckman-XL-MCL,但是这次使用的时候出现了，只能跑清洗程序，其他程序均没有检测信号。用cleaning panel 跑荧光微球可以

如果其它程序测不到信号，一个可能会不会与你的阈值设置有关，另一个能否确认取到的信号是beads？
不过 我对beckman的机器不是很熟，我帮你再找个熟悉beckman机器的人

stef1981

我们也有Beckman-XL-MCL，没有遇到你说的问题。每个protocal的信号电压是不同的，可能是“其他的protocal”荧光信号电压太低，建议调高电压值。

zml

stef1981 发表于 2012-12-7 09:49

                               
登录/注册后可看大图

我们也有Beckman-XL-MCL，没有遇到你说的问题。每个protocal的信号电压是不同的，可能是“其他的protocal” ...

谢谢了，昨天已经叫工程师修好了。

niwanmao

zml 发表于 2012-12-08 09:06:02

                               
登录/注册后可看大图

[quote]stef1981 发表于 2012-12-7 09:49 [url=forum.php?mod=redirect&go

工程师应答挺快的嘛。是什么原因，可以分享吗？

zml

niwanmao 发表于 2012-12-8 11:48

                               
登录/注册后可看大图

工程师应答挺快的嘛。是什么原因，可以分享吗？

原因是进样的柱子那边由于漏液，都腐蚀生锈不能动，所以不能进样，但是那里漏和漏的原因还要再排查。还想向各位前辈请教下，我每次上样前都会用400目的筛网进行过滤，但是工程师说是我们把管路堵住了，所以想请教下各位是如何进行上样前处理呢？一定要看下显微镜，看是否是一个个单独的个体么？我实验中用的是细菌，短杆状，大约2-3um，谢谢了·

zml

niwanmao 发表于 2012-12-7 07:10

                               
登录/注册后可看大图

如果其它程序测不到信号，一个可能会不会与你的阈值设置有关，另一个能否确认取到的信号是beads？
不过  ...

谢谢老师了·

nsync4

我们也用的是这个仪器，如果是管路堵了，应该是都没有信号。分好多情况，可能是进样针、flow cell或者后面的液路堵了，应该不走样了。能具体说一下你是哪里漏液了吗？

niwanmao

zml 发表于 2012-12-8 12:34

                               
登录/注册后可看大图

原因是进样的柱子那边由于漏液，都腐蚀生锈不能动，所以不能进样，但是那里漏和漏的原因还要再排查。还想 ...

是这样的，我们在平时标本处理中也会发现，尽管我们处理前都经过了300目筛网过滤，但是小部分标本（尤其是骨髓，外周血较少见）在染色、红细胞裂解、离心处理之后，上机前还是出现了团块，这些团块有点像粘丝状，有点像是细胞死亡之后形成的，我们这台旧机器的液路就是这样被弄脏的，因为尽管通过大冲洗能够冲出来，但是长期这样，就很容易在液路里面留下一些脏东西出不来。

但是很奇怪，PBS、裂解液都没有问题，而且以前我自己处理的时候似乎这种情况很少出现。原因想不通，所以，我现在只能建议我的同事们每次上机前都先将上样管斜过来，对着亮光观察里面有没有出现可见的团块或大颗粒，如果出现了，一定要再次通过筛网过滤，以防止阻塞管道。

我估计你们用的细菌也是容易形成团块。建议上机前也采用同样方法观察一下是否存在团块或大的颗粒，再次过滤一下。

zml

nsync4 发表于 2012-12-8 19:43

                               
登录/注册后可看大图

我们也用的是这个仪器，如果是管路堵了，应该是都没有信号。分好多情况，可能是进样针、flow cell或者后面 ...

后面的液路，就是手动进样后面的三个合在一起的柱子