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[凋亡检测] Annexin-V-FLUOS assay kit 能区分细胞死亡与调亡?

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发表于 2013-1-8 11:06:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
倪老师,最近看到一篇文献,文献上说是用Annexin-V-FLUOS assay kit (Roche)试剂盒Annexin-V和PI染细胞进行细胞死亡分析。
文献全文见附件。请见图2和图4。
该试剂盒跟我们常用的Annexin-V-FITC一样。
但有一点我不明白,死亡细胞和晚期调亡细胞都染色,在UR象限上,他是怎么进行细胞死亡分析的呢?也就是说,他是怎么区分双染的细胞中,哪些是死亡,哪些是凋亡呢?


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以前认为AV+PI+是晚期凋亡,但是现在很多文章都认为算到死亡细胞中,仅仅把AV+PI-的细胞看做凋亡。
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发表于 2013-1-8 11:06:28 | 显示全部楼层
以前认为AV+PI+是晚期凋亡,但是现在很多文章都认为算到死亡细胞中,仅仅把AV+PI-的细胞看做凋亡。
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发表于 2013-1-8 17:24:59 | 显示全部楼层
其实确定是凋亡的细胞只有AV+PI-,AV+PI+的细胞形成的原因太多:凋亡、坏死、制备都有可能造成,像倪老师说的,现在凋亡率只看AV+PI-跟双阴性细胞的比率。另外从我们的AV/PI双参图也可以大致看出凋亡还是坏死途径,纯凋亡途径一般是90°角的走向,及阴性,AV单阳,双阳。而坏死一般是斜上直接从阴性到双阳,会有一点点向AV单阳的弧度。因为坏死的结果是膜通透性的改变,不存在PS外翻,所以基本上是直接奔向双阳区的,在一个合适的时间点可以看到趋势。

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 楼主| 发表于 2013-1-8 18:40:14 | 显示全部楼层
噢,是这样。谢谢倪老师和站友“didi_zhou"。
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