周期分析中的解释问题。

cccssszzz08

各位高手、老师们，最近做周期。想通过周期来解释细胞的生长状态问题。
细胞是经过一种纳米材料孵育24小时后进行检测的，通过MTT和LDH的释放试验都能证明材料是具有一定的细胞毒性的。但是如果通过周期怎么来进行解释呢？下面先上图两张：

周期图

这两个图分别是ModFit分析得到的结果和通过量化统计得到的结果。我个人的分析是，在材料的加入后S和G2/M期增多，而且随着材料的量增大，G2/M期随之增多。那能不能说是阻滞在了G2期呢，细胞不能向下一个周期进行分裂，所以才显示出这种材料的毒性？
但是以前看到文献说是S期增多是一种促增殖的表现，说明周期从G0/G1期向S期推进。但是在我的实验中，S期虽然增多了，但是别的实验结果却明明是抑制的，不知道该怎么解释了。希望大家能一起讨论一下!
关于Cell Cycle,我是这样理解的，周期本来就是一个Cycle，从哪开始从哪结束都不好说，是个循环的过程，所以我就想不管是推进还是阻滞都应该是一个相对的过程吧。比如说同时做了两个药物，一个是促进细胞增殖的，另一个是抑制细胞生长的。但是周期的结果都是S期增多，那么我能不能解释成促进增殖的药物推进细胞周期从G0/G1期到S期，而抑制生长的药物是把周期阻滞在了S期呢？
由于小弟本专业并不是生科方向，所以研究起来这个比较吃力，还请老师们给我一个正确的答案，在此我先谢过啦！
如果有关于解释周期在增殖和抑制方面的文章或者书籍，也可以向我推荐一下，不胜感激！

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-01-18 01:03:19

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2013-1-17 14:15 [url=forum.php?mod=redirect&go

应该可以的，只是感觉不典型，可能坏死的多一点，试试看吧

niwanmao

如果你的MTT实验提示材料有细胞毒性，那么应该分析细胞死亡或凋亡比例才对，而不应该纠结于周期阻滞。

建议你放一下周期分析时FSC/SSC的设门图

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-1-17 10:40

                               
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如果你的MTT实验提示材料有细胞毒性，那么应该分析细胞死亡或凋亡比例才对，而不应该纠结于周期阻滞。

建 ...

Gate图已经上传了。我是想分析凋亡和死亡的比例，但是要买双染盒子又有点不太合适，为了一个小实验不值当的。而且我还想，既然对细胞生长有了影响，那么周期应该会有变化吧。
还有一点就是，通过周期来分析死亡细胞，应该是看Sub-G1的峰吧？但是我的图上碎片不是很明显！而且这个SUB-G1不能区分凋亡和死亡，现在学术界用它来评价材料毒性还会被认可吗？

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-01-17 12:36:18

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2013-1-17 10:40 [url=forum.php?mod=redirect&go

亚G1峰评价细胞凋亡还是可以的，你可以在分析时把model选择界面的apoptosis选项勾上。
关于gate，我发现你第一排标本和后面两排标本略有不同，不知道为什么？可以考虑用不规则形来圈细胞。

从fsc/ssc图来看，细胞死的还是比较多的

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-1-17 14:15

                               
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亚G1峰评价细胞凋亡还是可以的，你可以在分析时把model选择界面的apoptosis选项勾上。
关于gate，我发现你 ...

哦，谢谢倪老师的点拨。我那时候圈门之所以不同是因为当时只是为了让周期的图好看点，一开始没有打算分析凋亡，只想看周期。以您的经验来看，这样的结果能分析出sub-G1的凋亡峰吗？

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-1-17 14:15

                               
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亚G1峰评价细胞凋亡还是可以的，你可以在分析时把model选择界面的apoptosis选项勾上。
关于gate，我发现你 ...

哦，谢谢倪老师的点拨。我那时候圈门之所以不同是因为当时只是为了让周期的图好看点，一开始没有打算分析凋亡，只想看周期。以您的经验来看，这样的结果能分析出sub-G1的凋亡峰吗？
我会尝试着用不规则门来圈，到时候再给您看吧！