关于细胞内Ca2+浓度的测定！

cccssszzz08

各位战友们，关于细胞内钙离子浓度的测定现在用的什么方法比较多呢？  我看到有人用FLOU-3AM来测定。关于这个探针，我有点小问题想向大家请教一下！  FLOU-3AM的说明说上写的是检测细胞内的钙浓度，但是这个细胞内是指胞内总浓度吗？还是指的是游离在细胞质内的浓度？  如果是胞内总浓度的话，那是不是还要包括细胞器内的？  希望做过的老师们可以指点一下。

niwanmao

是检测游离钙离子。不过我也没有做过，敬请参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-127-1-1.html

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-3-11 10:36

                               
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是检测游离钙离子。不过我也没有做过，敬请参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-127-1-1.html ...

谢谢倪老师。  检测游离的钙离子是没错的，因为这个探针的检测原理就是这样的。
但是我的疑问是，探针进入到细胞内以后，是否能进入到细胞器中，比如说是线粒体。如果能进去的话，就是检测所有胞内的游离钙，而不是单纯的检测细胞质内的游离钙。  
如果这个探针不能进入其他细胞器，就应该是单测细胞质中游离的钙了。

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-03-11 11:22:27

                               
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谢谢倪老师。  检测游离的钙离子是没错的，因为这个探针的检测原理就是这样的。
但是我的疑问是，探针进

读了下这篇章节：   http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=115 ，第12页，为了做出钙离子浓度标准曲线，需要用离子霉素等使钙离子尽可能降低到0，但是对于某些细胞离子霉素无法穿透，所以无法使钙离子浓度降到0，这就表明钙离子检测时是检测所有部位的游离钙离子。你觉得呢？

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-3-11 13:09

                               
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读了下这篇章节： http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=115，第12页，为了做出钙离 ...

嗯，我十分认同这个说法！看来FLOU-3AM应该就是测定所有的游离钙，只要有钙离子游离出来，不管是细胞器还是细胞质都能被检测。  谢谢倪老师了！

adaliang1234

cccssszzz08 发表于 2013-3-11 18:56
嗯，我十分认同这个说法！看来FLOU-3AM应该就是测定所有的游离钙，只要有钙离子游离出来，不管是细胞器还 ...

Fluo-3 AM在流式细胞术中常被用于检测胞内游离钙离子总浓度