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流式细胞术中的同型对照

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发表于 2010-8-1 18:54:12 | 显示全部楼层 |阅读模式

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标题:流式细胞术中的同型对照

同型对照(即Isotype Control),是与该抗体相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同亚型的免疫球蛋白,用于检测由于抗体非特异性结合而产生的背景染色。一般来说,每种单抗在说明书中都列出有其相应的同型对照;如果是多抗,可以用与该抗体来源相同的正常血清作为同型对照。

阴性对照(Negative control),是指使用除了处理因素(如药物)之外,其它实验条件相同的细胞,进行相同的抗体染色,以此作为实验的阴性对照。

在流式细胞术的检测中,同型对照比阴性对照更重要,抗体的表达率是依据同型对照设定的标尺进行界定的。

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发表于 2019-9-19 17:21:11 | 显示全部楼层
倪老师,您好,我想问 一下同型对照抗体,只要是种属来源、亚型和荧光相同就可以了吗?同型抗体可以共用吗?比如我购买小鼠抗人PD-1抗体FITC荧光抗体,其同型抗体为 Isotype: FITC Mouse IgG2a, k,我购买的另外一种抗体小鼠抗人的CD56 FITC抗体,同型抗体为 Isotype: FITC Mouse IgG2a, k;我想问一下,如果我测CD56,可以用PD-1的同型抗体吗?还是只能每一种蛋白分子对应一种同型抗体呢?
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发表于 2019-12-17 11:08:41 | 显示全部楼层
老师,想问一下如果用四种抗体标记染色,选的同型对照是用什么呢?
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 楼主| 发表于 2019-12-17 23:12:59 来自手机 | 显示全部楼层
Deanou 发表于 2019-12-17 11:08
老师,想问一下如果用四种抗体标记染色,选的同型对照是用什么呢?

已在http://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=8126 回答,同型对照概念基本上成过去时了。
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发表于 2020-7-10 13:21:32 | 显示全部楼层
同型对照和指标同种属、同亚型,同荧光,型但是不同生产厂家,有参照意义吗?
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 楼主| 发表于 2020-7-11 10:48:13 | 显示全部楼层
刘小黑 发表于 2020-7-10 13:21
同型对照和指标同种属、同亚型,同荧光,型但是不同生产厂家,有参照意义吗? ...

可以,但是同型对照一般多数情况下都不需要用,用Fc 阻断+正确的染色步骤+合适的生物学阴性对照都能解决。
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