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如何尽量减少单核细胞、粒细胞与血小板的粘连

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发表于 2013-4-23 11:33:46 | 显示全部楼层 |阅读模式

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在做免疫分型或其它粒、单核方面的检测时,我们发现,单核细胞、粒细胞与血小板的粘连很难避免,经常会在粒、单核细胞上发现CD61等表达。这是很让人头痛的问题,故今日搜了下,发现一些资料,特地翻译了一下,与大家共享。

EDTA是一种强力的钙螯合剂,可使血小板表面的GPⅡb/Ⅲa受体解离,因此,不适合血小板功能的研究。
肝素可结合并活化血小板,导致P选择素表达和单核细胞血小板聚集物的假性增高。
柠檬酸钠相对来说更适合血小板功能方面的检测,然而,柠檬酸钠抗凝的标本抽取后会在15分钟内就开始形成单核细胞-血小板聚集物(Monocyte-platelet aggregates,MPAs),因此标本需要在抽取后尽快固定,否则容易导致MPAs假性增高。

下面是一些做血小板的相关protocol链接,请有权限的朋友上传分享,每篇protocol文档奖励2颗流星:
http://link.springer.com/protocol/10.1007/978-1-62703-339-8_18
https://www.thieme-connect.com/e ... .1055/s-2004-835671
http://www.currentprotocols.com/WileyCDA/CPUnit/refId-cy0615.html




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发表于 2013-5-6 11:25:16 | 显示全部楼层
第一篇: Platelet Flow Cytometry
相关专帖介绍:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2351-1-1.html

使用流式中文网资料阅读器在线阅读,免流星,内容与附件完全一样,且支持划词翻译使用帮助

(如图片无法正常显示请复制链接:http://www.flowcyto.cn/bbs/reade ... 6wvmwwdVEGXBdSP4Hbo

◢如确实需要下载附件,请见: Platelet_fcm.pdf (927.98 KB, 下载次数: 51, 售价: 1 流星) ,下载需要1颗流星(为什么?

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发表于 2013-6-11 09:02:03 | 显示全部楼层
学习一下,就是想请教一下各位老师,如何在血小板悬液制备过程中尽量避免血小板的自发凝聚?洗涤过程中吹打轻柔?我之前看到文献中报道加入PPACK(一种凝血酶抑制剂,但价格好像很贵啊),还有用水蛭素或者其他类似的抑制肽,大家有没有什么高招?
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 楼主| 发表于 2013-6-11 09:32:15 | 显示全部楼层
dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-11 09:02
学习一下,就是想请教一下各位老师,如何在血小板悬液制备过程中尽量避免血小板的自发凝聚?洗涤过程中吹打 ...

血小板项目我目前也在考虑开展,所以经验没有,但从相关资料看,抽血、处理时间等因素非常关键。

首先抽血尽量使压脉带压力轻或不用压脉带,用21G大小的针头
其次 ,相对来说 ,柠檬酸钠是最好的抗凝剂。
再次,标本尽可能在抽取后15分钟内进行处理。
还有,用HBS稀释亦可减少血小板假性活化的概率。
详见:http://www.flowcyto.cn/bbs/reader.php?mod=flowreader&file=HWqF1zTmFjKvx41xCf7Aijr6wvmwwdVEGXBdSP4Hbo 的第7页
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发表于 2013-6-11 09:45:38 | 显示全部楼层
想请问一下老师,这个标本是从全血中分离的人血小板,用HEPES重悬上机,里面我圈出来的是否就分别代表血小板和红细胞,都是用的指数轴

PRP分析

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 楼主| 发表于 2013-6-11 11:06:19 | 显示全部楼层
dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-11 09:45
想请问一下老师,这个标本是从全血中分离的人血小板,用HEPES重悬上机,里面我圈出来的是否就分别代表血小 ...

从位置看应该是,但是最好再结合相关标记。
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发表于 2016-11-18 21:28:09 | 显示全部楼层
第三篇:Whole Blood Analysis ofLeukocyte-Platelet Aggregates。
支持划词翻译:
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTE1MTl8YWM1ZjkwMTF8MTcxMTY1MjY2OXwwfA%3D%3D


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