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当然,这11点只是流式技术和质量上的保证,前提是需要你的实验理论依据是正确的,设计是合理的才行
- 阅读大量正确而权威的流式方法,而不仅仅只参考厂家的protocol(流式中文网protocol专版:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... ypeid&typeid=35);
- 了解哪些荧光可在您的流式细胞仪上正确工作;
- 设计抗体方案时,尽可能选择那些亮度高而渗漏少的标记;
- 滴定您的抗体。有时候其实厂商推荐的用量是过量的,例如下面的CD4滴定图(实名验证站友及以上级别可查看).
- 列出您的“战斗”计划。一般的PROTOCOL只能帮助你做好该项实验,但真正实施时,还是需要对其中用到的各项试剂、耗材以及每一步所需做的详细工作做出一个真正有效的规划(参见下面的规划示例图,实名验证站友及以上级别可查看)。
- 总是使用死细胞鉴别标记,死细胞标记能有效去除一些非特异性染色,使细胞分群更清楚,分析更客观(参见下面的死细胞染色分析比较,左侧为未使用死细胞染料去除死细胞,存在一群非特异性细胞,右侧去除死细胞后,分群非常清楚,注册会员及以上级别可查看)。
- 为每一次实验均设置正确的FMO对照(荧光扣除对照)。
- 使用Antibody Capture Beads来调节补偿,这使得补偿调节更稳定、更方便。(流式中文网注:对于此类beads,我也是初次接触,网上大致搜了下,似乎只找到coulter的VersaComp Antibody Capture Beads,不知道其它公司是否也有?)
- 尽量以低速获取您的标本,以得到更高的分辨率。
- 尝试使用多种设门方法来分析您的数据(如反设门、去除粘连体设门等等)。
- 定期对您的仪器进行质控,并建立每个应用特异性的质量保证protocol。
(流式中文网简译,详细内容请参见下方原文解释和图片,实名验证站友及以上级别可查看)
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